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小欣1211

金虫 (小有名气)

[求助] 薄层色谱为什么没有点

我的样品是过大孔树脂20%乙醇洗下来的,可是在做薄层色谱的时候,那个点样的点还在那,上面一个点都没有,开始用石油醚乙酸乙酯,石油醚丙酮,氯仿甲醇,后来我以为是极性太小,就换了甲醇水,可是结果还是一样,显色剂是10%硫酸乙醇,哪位大侠知道是什么原因呢,是样品浓度问题还是展开剂极性问题呢?

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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呵呵~~
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by zlong2008 at 2011-10-15 14:24:04:
既然展开剂都试了(20%洗脱下来的成分应该极性较大吧),应该是样品浓度的问题,我点样一般都浓缩到0.1毫升。

浓缩到0.1毫升?那点样应该点多少呢?
呵呵~~
3楼2011-10-15 14:41:06
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yumulin at 2011-10-15 14:45:06:
1、可能是没有显色出来,加大点样浓度或多尝试几种显色剂,你想分离的是什么类型的物质啊,香草醛,荧光,多种显色途径尝试一下
2、如果你怀疑是展开剂的问题,那么可以从最初单一的展开体系开始,比如纯甲醇,然 ...

我做的黄酮,我看文献上也有用氢氧化钠显色的,可是硫酸不是通用的么,而且那个点样的点还能看见,就没动,所以我觉得应该是展开剂的问题,是不是极性小呢?还是样品浓度或者点样太多或者太少?
呵呵~~
5楼2011-10-15 15:01:34
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小欣1211

金虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by myvigor at 2011-10-16 12:04:01:
20%的乙醇洗脱部位极性太大了,你用的展开剂极性一般都不合适,试用下BWM系统,或者换换你的板,用反相板试试可能展开。

我是新手,不知道你说的那个系统,能不能具体点,还有那个反相板,谢谢啦
呵呵~~
9楼2011-10-16 13:11:28
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yumulin at 2011-10-16 19:06:52:
点样太多的话起码会有拖尾,首先确定你的提取液中确实含有你的目标成分,如果确定有的话,再从展开和显色考虑。显色剂的制备应该没有问题吧,现用现配?

我现在还没有目标成分,没有点不是什么东西都没有么,那不可能吧,显色剂要现配么,那个硫酸,真不愿意总碰它
呵呵~~
12楼2011-10-16 19:21:59
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 平常心11 at 2011-10-16 19:21:12:
建议你在药典或文献中找些同类的方法借鉴一下,供试品浓度一般是制成每1ml含相当于生药材1g,点样量2-5ml,看情况再调整浓度,展开系统文献和药典中多了,显色剂你可以试试1%三氯化铝乙醇溶液,显色后在紫外光灯3 ...

那个显色剂我也看了,具体是怎么用的,也是喷上么,我们这穷,不知道有没有那个紫外灯,哎
呵呵~~
13楼2011-10-16 19:27:00
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 420912769 at 2011-10-16 20:48:02:
b是正丁醇 m是甲醇 w是水 好像是5比2比1

可是正丁醇和水不是不溶么?
呵呵~~
15楼2011-10-16 21:09:47
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
19楼: Originally posted by ltj106 at 2011-10-17 09:30:53:
展开剂的极性太小了 换用氯仿甲醇试试 2:1  如果还展不上去  就加点水

我连甲醇和水都试过了,还是看不到点,所以觉得是显色剂的问题,那个显色剂,喷少了怕县不出来,喷多了一烤就焦,真纠结
呵呵~~
20楼2011-10-17 09:47:36
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by myvigor at 2011-10-17 10:37:40:
正丁醇:甲醇:水65:35:10,不过说实话,你这部位选的实在是不怎么地,新手就做大极性,压力太大。好好努力吧

我也觉得压力很大,所以应该考考虑做乙酸乙酯那部分的
呵呵~~
23楼2011-10-17 16:43:54
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