应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 有谁做过amoA引物 硝化细菌 pcr
51/1返回列表
查看: 2072  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

@@xiaowu@@

铜虫 (初入文坛)

[求助] 有谁做过amoA引物 硝化细菌 pcr

有谁做过amoA引物 硝化细菌 pcr
我做了很长时间 都没有做出来
降落 巢式 梯度pcr都试了
请大侠帮一下
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-10-12 18:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhhok

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857(金币+2): 鼓励一下^_^ 2011-10-17 17:21:45
@@xiaowu@@(金币+5): 谢谢 2011-10-18 13:25:13
1、调节模板DNA浓度；
2、加大循环数至40－42；
3、反应体系中加入BSA；
4、再扩不出来，考虑换个效率高一点的Taq酶。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-17 13:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

老夏853

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-10-13 10:54:39
@@xiaowu@@(金币+5): 谢谢 2011-10-18 13:24:54
引用回帖:
1楼: Originally posted by @@xiaowu@@ at 2011-10-12 18:42:33:
有谁做过amoA引物 硝化细菌 pcr
我做了很长时间 都没有做出来
降落 巢式 梯度pcr都试了
请大侠帮一下

我有做过~~
这个 你可以从一下几点考虑：
1 模板质量问题： 如果是土壤或者淤泥之类的 模板杂质过多 会影响pcr
2 模板中究竟有没有aob 的存在，最好能用其他方法验证一下，比如富集培养后显色反应
3 如果存在，用巣式的 应该会做出来效果很好，不过需要注意，第一次pcr产物需要稀释50到100倍
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-13 10:33:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 老夏853 at 2011-10-13 10:33:27:
我有做过~~
这个 你可以从一下几点考虑：
1 模板质量问题： 如果是土壤或者淤泥之类的 模板杂质过多 会影响pcr
2 模板中究竟有没有aob 的存在，最好能用其他方法验证一下，比如富集培养后显色反应
3 如果存在 ...

学习啦
回复此楼
以马内利！
3楼2011-10-13 11:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

闲花落地

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
zhang8826857(金币+5): 鼓励新虫 2011-10-24 10:22:24
建议先纯化好DNA，可以采用PCR产物纯化试剂盒纯化或专业的土壤DNA提取试剂盒纯化；其次改变PCR条件，我以前的做法是降低退火温度至49度，增加Taq酶用量至25U/50ul，增加循环数至35个。如果还是扩不出来建议重新提DNA，纯化，扩增。同时强调一点，环境样品DNA一定要分装保存在-80度冰箱，防止其降解。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-10-24 10:01:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 重要消息，中午系统在维护 +6 yuleib84 2026-08-18 7/350 2026-08-18 15:02 by sytp
[教师之家] 两姐妹，一个辛辛苦苦30岁工作当大学教师，另一个23岁就工作当开车教练 +3 瞬息宇宙 2026-08-11 5/250 2026-08-18 14:55 by LNP@mRNA
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +46 医学老男孩 2026-08-13 102/5100 2026-08-18 14:41 by qinwangshen
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 8/400 2026-08-18 11:47 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +4 Tide man 2026-08-14 5/250 2026-08-18 11:35 by Tide man
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 5/250 2026-08-18 11:25 by 無關想念
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +5 基诺咪客 2026-08-17 6/300 2026-08-18 11:06 by hunter无悔
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭