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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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1289622

木虫 (正式写手)

[求助] 求助血液样品处理问题

初次接触血样处理的实验有许多问题不是很明白:
1、分离血浆时采集的血液要立即离心,还是静置一会再离心?有时候采样点不能一次性完成不会影响实验吧?2、离心获得的血浆要立即放入冰箱中吗?由于采样的时间跨度在7个小时,这样之前分离的血浆要在室温条件下至少放置7个小时(实验的地方没有冰箱),这样可行吗?
3、怎样防止溶血现象?离心获得的血浆都是红色的,抽血时压力不是很大,将血液推入离心管时动作也很缓和(针头已经拔掉),为什么还有溶血现象?
4、-20℃保存的血浆可以保存多久?血浆怎样复溶?是放在室温下自然融化,还是要在一定的水浴温度下融化?
5、取空白血浆之前也要禁食吗?为什么?禁食多久?
6、血浆和血清样品必须要进行蛋白沉淀吗?有的说液液萃取不必进行蛋白沉淀,这种说法正确吗?
7、乙酸乙酯处理血浆,除能提取药物外还能融入血浆中的什么成分?用它提取药物,氮气吹干后再复溶发现离心管底部有些东西溶解不了,复溶的液体有块状漂浮物,这种情况该怎么办?会不会影响药物的复溶效果?
8、分离血浆用的肝素钠浓度一般是多大的?肝素钠中的水分对血浆样品有影响吗,什么影响?粉末状的肝素钠怎么配成溶液?
9、走液相时,样品的色谱峰不是较光滑的线条而是波浪形的线条,这是怎么回事?是柱子的问题吗,怎样解决?
10、冰冻的血浆样品复溶后血浆里面有一些絮状或是胶状粘稠物质,请问这是什么物质?取血浆的时候没有取到那些粘稠物质,这会影响血浆药物含量的测定吗?

[ Last edited by 1289622 on 2011-10-22 at 09:32 ]

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药代动力学……

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爱拼才会赢

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

4.不同的药稳定性不一样 一般放一个月问题不大 但时间最好别太长
7. 我们一般配1%的肝素钠水溶液,用枪头家1ml到子弹头里,然后再吸出来,留一滴在里面,烘箱里烘一小会儿就好了
9 血浆样品本来就很脏,波长低的时候很明显,萃取剂的选择要好好考察一下,甲醇 乙腈 高氯酸 还有一些盐都经常用 哪一种适合你的药 就用空白进进看吧 柱子加根预柱 要不对主子损害太大
10楼2011-11-11 16:27:10
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kkxxmyt_lh

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1289622(金币+10, 博学EPI+1): 2011-12-06 12:38:15
好多。。。偶来一个个说说个人的经验吧
1  最好是采集后尽快离心,不过我加了抗凝剂  感觉过了十几分钟一批样品全部出来再离心 也能很好的分离,个人觉得加了抗凝后只要注意不要大幅度晃动导致凝血就行。
2 当然是尽快放入冰箱的 如果实验室么有 就用个泡沫盒子 里面放个冰袋就行啊  低温总是好的  能做到的就尽量做到嘛  虽然我有时候也来不及放冰箱  但也是尽快放入
3 我每次都是加了抗凝以后 全血在ep管里上下轻微颠倒下  都木有溶血  这个完全看你操作了吧 包括放入离心机前也不要大幅度晃动
4 -20℃感觉可以挺久的  我最长一次保存了2-3个月 仍然测定出来了  用的是自然解冻的
5 最好禁食 因为一是和实验组平行 实验组禁食的啊 2是防止食物中的个别成分影响  但觉得影响可以忽略 禁食一般实验组是12-14个小时吧 自由饮水
6 当然要沉淀蛋白啊 不然会对柱子很大损伤 加沉淀剂沉淀蛋白 和液液萃取 都是除去蛋白的过程 因为萃取的过程中 蛋白萃取不出来 所以这两个选择一个效率高的就行
7 还能融入神马东西 这个偶还没考虑过 但是肯定有一些杂质在其中的,还有一些亲脂的东东,吹干后复溶时加入溶剂后,充分涡旋混匀 然后离心取上清 就可以把杂质除去  复溶后有杂质很正常的 所以都要离心取上清 不用担心
8  肝素钠我们一般都是直接用毛细管挑一点放入子弹头 然后弹开  感觉效果不错  因为配了溶液还要吹干 感觉很麻烦  配成溶液后抗凝好像是1:50-100 浓度我等会查查其他帖子 很多人都写过
9 你的不光滑是指神马不光滑?基线还是? 是基线平稳但是出峰不光滑?这个原因比较多  你详细说下 而且是ms还是液相
10血浆中的一些纤维蛋白 可能还有其他蛋白成分 你把它挑开放在一边 吸取液体的血浆 感觉影响不大 药物分散在液体血浆中的  不过没有影响也是不可能的 大家都有 也就平行了?呵呵


有什么情况在交流讨论吧
2楼2011-10-29 15:58:38
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1289622

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kkxxmyt_lh at 2011-10-29 15:58:38:
好多。。。偶来一个个说说个人的经验吧
1  最好是采集后尽快离心,不过我加了抗凝剂  感觉过了十几分钟一批样品全部出来再离心 也能很好的分离,个人觉得加了抗凝后只要注意不要大幅度晃动导致凝血就行。
2 当然 ...

第九个问题:是基线平稳但是出峰不光滑,液相。不知道怎样解决啊!

我处理血浆的时候是液液萃取的,但是血浆经10000转10分钟离心后,发现上面的有机相还是有些不澄清,有人说是乳化了,应该怎样解决?

一般怎样沉淀蛋白?
无水硫酸钠可以用来沉淀血浆蛋白吗?
0.5ml血浆中无水硫酸钠应该加多少,我曾过量加入(0.5g),发现血浆有盐块形成,这样是不是会影响药物的萃取啊?
3楼2011-11-05 21:25:27
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walkinghand

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xinmor: 如不回答问题请不要点应助,本版版规规定不允许灌水 2011-11-11 16:32:55
你这50金币挺赚啊,好像都是些基本常识啊,还好有好心人帮你,要我老板知道我问这些问题还不费了我啊,呵呵,别介意啊,顶你一下!
4楼2011-11-06 14:58:28
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