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1289622

木虫 (正式写手)

[求助] 求助血液样品处理问题

初次接触血样处理的实验有许多问题不是很明白:
1、分离血浆时采集的血液要立即离心,还是静置一会再离心?有时候采样点不能一次性完成不会影响实验吧?2、离心获得的血浆要立即放入冰箱中吗?由于采样的时间跨度在7个小时,这样之前分离的血浆要在室温条件下至少放置7个小时(实验的地方没有冰箱),这样可行吗?
3、怎样防止溶血现象?离心获得的血浆都是红色的,抽血时压力不是很大,将血液推入离心管时动作也很缓和(针头已经拔掉),为什么还有溶血现象?
4、-20℃保存的血浆可以保存多久?血浆怎样复溶?是放在室温下自然融化,还是要在一定的水浴温度下融化?
5、取空白血浆之前也要禁食吗?为什么?禁食多久?
6、血浆和血清样品必须要进行蛋白沉淀吗?有的说液液萃取不必进行蛋白沉淀,这种说法正确吗?
7、乙酸乙酯处理血浆,除能提取药物外还能融入血浆中的什么成分?用它提取药物,氮气吹干后再复溶发现离心管底部有些东西溶解不了,复溶的液体有块状漂浮物,这种情况该怎么办?会不会影响药物的复溶效果?
8、分离血浆用的肝素钠浓度一般是多大的?肝素钠中的水分对血浆样品有影响吗,什么影响?粉末状的肝素钠怎么配成溶液?
9、走液相时,样品的色谱峰不是较光滑的线条而是波浪形的线条,这是怎么回事?是柱子的问题吗,怎样解决?
10、冰冻的血浆样品复溶后血浆里面有一些絮状或是胶状粘稠物质,请问这是什么物质?取血浆的时候没有取到那些粘稠物质,这会影响血浆药物含量的测定吗?

[ Last edited by 1289622 on 2011-10-22 at 09:32 ]
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1289622

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kkxxmyt_lh at 2011-10-29 15:58:38:
好多。。。偶来一个个说说个人的经验吧
1  最好是采集后尽快离心,不过我加了抗凝剂  感觉过了十几分钟一批样品全部出来再离心 也能很好的分离,个人觉得加了抗凝后只要注意不要大幅度晃动导致凝血就行。
2 当然 ...

第九个问题:是基线平稳但是出峰不光滑,液相。不知道怎样解决啊!

我处理血浆的时候是液液萃取的,但是血浆经10000转10分钟离心后,发现上面的有机相还是有些不澄清,有人说是乳化了,应该怎样解决?

一般怎样沉淀蛋白?
无水硫酸钠可以用来沉淀血浆蛋白吗?
0.5ml血浆中无水硫酸钠应该加多少,我曾过量加入(0.5g),发现血浆有盐块形成,这样是不是会影响药物的萃取啊?
3楼2011-11-05 21:25:27
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1289622

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by walkinghand at 2011-11-06 14:58:28:
你这50金币挺赚啊,好像都是些基本常识啊,还好有好心人帮你,要我老板知道我问这些问题还不费了我啊,呵呵,别介意啊,顶你一下!

5楼2011-11-06 18:32:18
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1289622

木虫 (正式写手)

用乙酸乙酯处理的血浆,加乙酸乙酯4ml,涡旋离心,取上清液3ml,保证没有取到杂质,为什么吹干复溶进液相后,还是有许多的杂峰?
8楼2011-11-11 11:33:22
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1289622

木虫 (正式写手)

11楼2011-12-03 17:53:42
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