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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

[求助] 杂质峰过多

小弟最近做HPLC时遇到几个问题,跟大家请教
样品:黄酮葡萄糖醛酸苷(非流动相溶解)样品颜色:红色  溶解性:甲醇、水、乙腈都较好   柱子:25cm,4.6mm   C18     流动相:25%乙腈:75%水(0.1%甲酸)  柱温:室温   主峰保留时间:48min左右   主峰高500mUA左右,宽3min~4min左右
大家看看我的图,前面的杂质峰咋这么多呢,而且基线也一直不平,平衡柱子的时候基线是平的,之前样品是经过制备HPLC分过的,所以问两个问题:
1.   2~15min之间不规则的杂质峰到底是因为系统波动还是真的杂质?
2.   主峰放大后后面的尾巴是不平滑的,难道里面还有一个峰?还是拖尾时都这样?


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以无法为有法,以无限为有限
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yqx1985

木虫 (著名写手)

云中仙

【答案】应助回帖

muxiachuixue(金币+10): 2 2011-10-05 19:24:02
(1)主峰高500mUA,看样子你的杂质峰最大也达到200mUA,况且,仪器波动也不会是这样的。所以很有可能是杂质。另外,你的化合物是从制备液相制来的,所以看看你的制备条件,保留时间太长的话,容易制备不纯的。如果你想再确定下的话,加大进样量,看看这些杂质峰与主峰的相对峰高是否有变化。
(2)不平可能就是里面还含有东西。你可以改变一下条件,乙腈浓度大点,让目标峰早点出,这样看起来会更明显是不是主峰里面含有别的成分。另外,就这么两个峰,你干嘛搞到40多分钟才出峰?峰都展宽到3-4分钟了,分析条件有问题,应该改善下。
人面不知何时去,桃花依旧笑春风
7楼2011-10-05 18:33:33
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

你怎么进行处理的样品?
奋斗是金!
3楼2011-10-05 15:45:10
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muxiachuixue

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 408851978 at 2011-10-05 15:45:10:
你怎么进行处理的样品?

样品用甲醇溶解,脱脂棉过滤,再浓缩
以无法为有法,以无限为有限
4楼2011-10-05 15:53:24
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408851978

木虫 (著名写手)

道圣

【答案】应助回帖

过一下有机滤膜吧,0.45μm
奋斗是金!
5楼2011-10-05 15:57:21
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