24小时热门版块排行榜    

查看: 1986  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

丁砣子

金虫 (小有名气)

[求助] 正丁醇部分上反相硅胶柱条件摸索

我现在有个样品是正丁醇部分上大孔树脂30%洗脱下来的部分,三个点,正相硅胶板跑的时候用的二氯甲烷-甲醇体系,比例2:1时,Rf值相差0.1左右,再加大比例就冲上去了,因为样品只有100mg左右,怕正相吸附严重,所以准备上个反相硅胶,请问一下各位大侠我这个适合甲醇-水系统梯度洗脱吗?还是不用梯度啊?或者说上葡聚糖凝胶更好?另外还有个问题,我的反相硅胶是20微米的,用直径1.5cm下面有筛板的柱子上行不?会不会堵到筛板里面啊?垫棉花有用没?问题有点多,请好心人帮帮忙,给我答疑解惑吧,谢谢啦!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aj2003

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢回复! 2011-10-05 00:23:17
用少量的填料拌样。梯度跨度根据洗脱情况调节,流下来的东西很多就等度洗,不下东西了换梯度,我是这样做的。
把棉花弄实了,填料不会流出来的
4楼2011-10-03 21:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

aj2003

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
中药2000(金币+3): 谢谢应助。 2011-10-03 18:54:07
丁砣子(金币+3): 谢谢 2011-10-06 11:18:32
可以用反相薄层板摸条件,不过我用的时候没有摸索过,就从10%左右梯度洗,看洗脱情况调整甲醇比例,反相柱子流速很慢,我一般都是加压走,即使这样周期也会很长,最好不要用带筛板的柱子,会更加慢,就用棉花。
葡聚糖凝胶效果好不好,可能需要试验才知道,我的这个部位用凝胶基本没效果。
希望对你有所帮助
2楼2011-10-03 12:07:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丁砣子

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by aj2003 at 2011-10-03 12:07:42:
可以用反相薄层板摸条件,不过我用的时候没有摸索过,就从10%左右梯度洗,看洗脱情况调整甲醇比例,反相柱子流速很慢,我一般都是加压走,即使这样周期也会很长,最好不要用带筛板的柱子,会更加慢,就用棉花。
...

我们实验室没有反相薄层板,用填料去铺的话我又怕倒来倒去损失多了,就那么点,我之前的样品一直是用醇溶的,也没具体统计过比例,我如果把样品挥干以后,再加甲醇-水,然后用使它溶解的这个比例作为第一个比例,是否可行呢?另外对洗脱剂梯度的跨度大小有要求没?用棉花硅胶不会从缝隙里面流出来吗?谢谢啦
3楼2011-10-03 16:06:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

丁砣子

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by aj2003 at 2011-10-03 21:29:06:
用少量的填料拌样。梯度跨度根据洗脱情况调节,流下来的东西很多就等度洗,不下东西了换梯度,我是这样做的。
把棉花弄实了,填料不会流出来的

哦哦,不过我以前拌样的时候都有在水浴锅上加热,这个反相硅胶能加热吗?
5楼2011-10-04 09:53:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见