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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 实验求助
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liping1006

新虫 (初入文坛)

[求助] 实验求助

我最近做western 时，我的分子量本来应该在120左右，但是我在120处没出结果，却在180处出现，这个差异是不是太大了
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1楼 2011-09-26 16:19:24
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07280909

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能的原因
1. SDS-PAGE的胶浓度多大？因为不同胶浓度对分子量不同的蛋白分辨率不同
2. 你的120Kda蛋白是来自动物细胞的，还是来自原核表达的？真核表达的蛋白质常常被修饰，比如糖基化，实际分子量会大于甚至远远大于推导出的分子量
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2楼2011-12-30 22:06:27
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Etvob

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验给的预处理会不会导致你所要的目标蛋白构象改变、被修饰或者与其他蛋白形成复合物之类的？
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3楼2012-02-16 11:29:10
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zhu19491001

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
呵呵 抗体没问题？还是你搞清你的目的蛋白分子量了吗？
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4楼2012-03-09 20:56:07
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zldd0407

新虫 (初入文坛)
谢谢了 过来学习学习
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5楼2012-04-02 18:09:52
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