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友谊无限金虫 (小有名气)
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如何正确计算药代中药物的提取回收率？
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大家好！ 我正在做药代动力学中药物的提取回收率，看了很多文献，但提取回收率的做法不一，所以想请教大家给予正确的做法。 我是这样做提取回收率的：1.取一个浓度的标准溶液（比如8ug/ml的标准液）100ul，加入空白血浆0.5ml，再加内标50ul，加少量磷酸后，涡旋混匀。然后加入3ml的乙酸乙酯进行萃取，涡旋3min，离心（4000r/min）10min，取一定量的上清液，在45°C水浴中氮气流吹干，残渣用流动相150ul复溶，高速离心后，进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A1、A2，R1=A1/A2。 2. 另取8ug/ml的标准液100ul，再加内标50ul，混匀后于45°C水浴中氮气流吹干，残渣用流动相150ul复溶，高速离心后，进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A3、A4，R2=A3/A4 。 提取回收率的计算如下： 方法一：R=A1/A3 （直接用药物峰面积之比计算） 方法二：R=R1/R2 （用药物与内标的比值计算） 请教各位做药代动力学的朋友，我所做的药物提取回收率方法是否正确？ 计算提取回收率是应该用方法一，还是方法二？ 我参考了许多文献，但做法不一，所以希望大家能给予帮助，非常感谢！ |
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【答案】应助回帖
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您好~写得很详细，谢喽！  ~我最近在做基质效应，但是效果很不理想~麻烦您帮我看看有什么问题~精密量取空白血浆100μl，加入200μl混标，涡旋1min，加乙酸乙酯100μl，涡旋3min，14000r/min，离心15min，取上清液50μl。再加入乙酸乙酯100μl，同法操作，取上清液100μl，合并两次上清液，室温下氮气吹干。残渣用50μl乙腈复溶。每个浓度平行制备3份。得到的峰面积为A1。混标峰面积A2。基质效应=A1/A2.但是问题是我计算出的数值很大。有百分之两百的，大部分是百分之六七十。重复做了三批样品了。四个化合物的数值都很大。这是什么原因。您做的时候结果怎么样？都能在100%左右？？？一定要回复我呦~~谢谢啦！ |
26楼2012-08-06 15:34:34
2楼2011-09-24 14:37:08
友谊无限
金虫 (小有名气)
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- 注册: 2010-10-08
- 专业: 药物代谢与药物动力学
3楼2011-09-24 16:44:18
4楼2011-09-24 17:15:57