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友谊无限

金虫 (小有名气)

[求助] 如何正确计算药代中药物的提取回收率?

大家好!
   我正在做药代动力学中药物的提取回收率,看了很多文献,但提取回收率的做法不一,所以想请教大家给予正确的做法。
   我是这样做提取回收率的:1.取一个浓度的标准溶液(比如8ug/ml的标准液)100ul,加入空白血浆0.5ml,再加内标50ul,加少量磷酸后,涡旋混匀。然后加入3ml的乙酸乙酯进行萃取,涡旋3min,离心(4000r/min)10min,取一定量的上清液,在45°C水浴中氮气流吹干,残渣用流动相150ul复溶,高速离心后,进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A1、A2,R1=A1/A2。   2. 另取8ug/ml的标准液100ul,再加内标50ul,混匀后于45°C水浴中氮气流吹干,残渣用流动相150ul复溶,高速离心后,进样30ul。得到药物与内标的峰面积分别为A3、A4,R2=A3/A4 。
   提取回收率的计算如下:
   方法一:R=A1/A3 (直接用药物峰面积之比计算)
   方法二:R=R1/R2  (用药物与内标的比值计算)
   请教各位做药代动力学的朋友,我所做的药物提取回收率方法是否正确?
   计算提取回收率是应该用方法一,还是方法二?
   我参考了许多文献,但做法不一,所以希望大家能给予帮助,非常感谢!
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lwfazyy

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-10-02 23:35:54
友谊无限(金币+1): 2011-10-17 17:32:53
引用回帖:
1楼: Originally posted by 友谊无限 at 2011-09-24 13:38:15:
大家好!
   我正在做药代动力学中药物的提取回收率,看了很多文献,但提取回收率的做法不一,所以想请教大家给予正确的做法。
   我是这样做提取回收率的:1.取一个浓度的标准溶液(比如8ug/ml的标准液)100ul ...

刚刚想起你做的一点不妥的地反个,再指出一下

你的方法是,标准溶液100ul+空白血浆500ul+内标50ul......来提取,这种做法是不可取的。
为保证浓度相当,可加入10倍浓度的标准溶液10ul+空白血浆500ul+10倍浓度的内标5ul.......
因为你原方法不能很好的模拟实际血样测定的情况,过分改变了样本组成。

目前国内好多单位做分析是楼主原方法那样来做,文章也是这样发的,但是,是欠妥的。

想起一点回一点儿,有点罗嗦,呵呵
没有到不了的明天!
21楼2011-10-02 12:21:06
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查看全部 29 个回答

兰黛诗

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

友谊无限(金币+3): 2011-09-24 16:41:35
那你的标曲如何做?
直接用A1/A2吧
方法一是没道理的,根本体现不出内标的作用
方法二虽然体现了内标的作用,但是太繁琐了吧,没有必要
2楼2011-09-24 14:37:08
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友谊无限

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 兰黛诗 at 2011-09-24 14:37:08:
那你的标曲如何做?
直接用A1/A2吧
方法一是没道理的,根本体现不出内标的作用
方法二虽然体现了内标的作用,但是太繁琐了吧,没有必要

感谢指导!  我的标曲是用A1/A2做的,如果方法一、方法二都不合理,请问如何计算才正确?  谢谢!
努力追求更好!
3楼2011-09-24 16:44:18
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兰黛诗

金虫 (小有名气)

不用客气,我做的回收率是将加样回收率的样品直接进样,得到样品与内标的峰面积比值,带入标准曲线,计算样品含量,将计算所得含量比加样量。
4楼2011-09-24 17:15:57
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