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加端PCR
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这个我是在载体上直接加端PCR，PCR的引物在图中，不得不产生这样的结果。。 我用的是pfu的酶的，条件是 up-primer 20pmol low-primer 20pmol 模板质粒 dNTP 25mM 0.3ul pfu buffer 94℃ 1m，65.7℃ 45s，72℃ 1m48s， 72℃ 10m 30循环。 图8是胶的结果 目的的条带在880bp，条带显示是500bp和750bp之间。 1 2 是上游引物，下游引物的 duplex， 3 4 是上下游引物的 hairpin结构 5 6是 是上下游的错配 7 是oligo的PCR分析 各位大神帮我看看是咋回事。         |
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