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sayfxxk2u

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[求助] 加端PCR

这个我是在载体上直接加端PCR，PCR的引物在图中，不得不产生这样的结果。。
我用的是pfu的酶的，条件是
up-primer 20pmol
low-primer 20pmol
模板质粒
dNTP  25mM 0.3ul
pfu buffer
94℃ 1m，65.7℃ 45s，72℃ 1m48s， 72℃ 10m 30循环。
图8是胶的结果  目的的条带在880bp，条带显示是500bp和750bp之间。

1  2 是上游引物，下游引物的 duplex，
3  4 是上下游引物的 hairpin结构
5 6是是上下游的错配
7 是oligo的PCR分析
各位大神帮我看看是咋回事。

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1楼 2011-09-21 14:33:40

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