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【求助、交流】如何提高 实时荧光定量PCR 标准曲线的扩增效率
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最近在做实时荧光定量PCR，做的是绝对定量。在做标准曲线时，扩增效率不高，怎么提高扩增效率？ 采用的是三步法，95°，30s，95°，10s，60°，30s，72°，30s。 扩增片段514bp， 扩增体系：SYBR Green 12.5，primer 2，ddH2O 9.5，模板 1。 试剂是TaKaRa的，R方0.998，扩增效率很低，不知该如何提高？ 提高引物的浓度是试过了，还是不行，模板是提取的质粒稀释的梯度（1~7次方），请求各位高手指点，谢谢谢！！！！ 扩增效率影响的因素有哪些？操作过程中有啥需要特别注意的地方没？   |
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