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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求教有关SDS-PAGE凝胶的问题
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饼哥

木虫 (正式写手)

[求助] 求教有关SDS-PAGE凝胶的问题

虫友们，我最近在跑SDS-PAGE，这几次发现制完分离胶后用水封,胶凝后,胶面不是一个直线,而是略向上鼓起。以前不是这样的，都是一条直线，这是咋回事啊？
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爱科研，更爱小木虫！
1楼 2011-09-12 15:44:23
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
20楼: Originally posted by charles08 at 2014-06-10 16:56:49
我的情况很奇怪的，去年冬天用水封的，随便都可以制出质量很高的胶，分离胶面非常平，跑出的胶质量极高。
今年5月开始跑胶就不行了，制出来的胶总是不齐整，坑坑洼洼，想了好多办法，还是不行，跑出的带也经常呈弥 ...

师弟，淡定，分子生物学实验的魅力就在于此，很多事情找不到原因说不明白，重点在于解决它。建议你把制胶用的水换一下，有条件的话，用配制细胞培养基的超纯水去制胶。封胶，200μL无水乙醇就够了。我最初用2mL，后来发现没必要，200μL无水乙醇足够！
再说一句，我已经毕业一年了，回想起实验室的点点滴滴，心里满满的幸福，但是知道再也回不去了。珍惜你现在的时光！
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爱科研，更爱小木虫！
22楼2014-06-11 04:26:06
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★ ★
西瓜(金币+2): good 2011-09-12 23:41:48
水封也行,要缓慢均匀加入
用异丁醇封不错!
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-12 19:24:19
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-12 19:24:19:
水封也行,要缓慢均匀加入
用异丁醇封不错!

仔细想想，我这几次水封确实加得有点急，明天我再试一次，要是还不行，就用你说的方法看看。
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爱科研，更爱小木虫！
3楼2011-09-12 22:45:23
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-09-13 07:45:43
用无水乙醇缓慢封之。
因为凝胶较慢，因此，如果不放心，封完后轻轻摇动使之均匀压平。
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4楼2011-09-13 07:37:49
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