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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 有无必要制备动物血清进一步做细胞试验？
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bianyu

铜虫 (正式写手)

[求助] 有无必要制备动物血清进一步做细胞试验？

植物提取物的体内抗纤维化效果还不错，但是对HSC-T6的体外实验一直没有阳性结果，有人建议制备动物血清，然后用血清做细胞试验，看看是不是药物的代谢物在起作用？
请教大家：
（1）这种方法是不是属于药代动力学的范畴？在我的这个实验上可不可行？有无必要啊？
（2）动物血清的制备方法，我查了好多资料是制备免疫动物血清的，请问有什么区别?
谢谢！
提前祝大家节日快乐！
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1楼 2011-09-07 11:28:12
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19870224dan

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1181713楼: Originally posted by pal2004 at 2011-09-07 17:49:34
验证代谢物用MS比较快，只要液质条件合适，如果血样指纹出现了某个提取物中没有的新成分，而且呈剂量依赖性变化，那就有可能是你要的代谢物，当然最关键的是要做结构确证，不管用什么手段，只要分出来的东西够打谱 ...

我的代谢物就是新化哎，代谢物量很少，大概原形的4%吧。仅凭LC-MS/MS我不能推断其结构，所以想获得纯品做NMR，就像你说的，体液富集太难啦，但肝微粒体孵育没有产生我的目标物质，也就是体外转化与体内不同，我该咋办呢？真心求教！
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12楼2012-08-21 21:07:02
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pal2004

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
bianyu(金币+10): 谢谢，还有待于进一步学习 2011-09-07 13:45:16
jiangchunyong(金币+1): 谢谢应助!欢迎常来！ 2011-09-07 13:49:02
用含药血清培养细胞当然可以，但是做出了活性，如果怀疑是代谢物产生的活性，首先应该验检测代谢物是否存在，可以做体外药代研究，比如模拟胃肠道环境以及用肝微粒转化提取物；也可以做体内药代，分析体液，检测化学成分变化，分离纯化可能的代谢产物，最后药效验证。
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2楼2011-09-07 13:07:23
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bianyu

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pal2004 at 2011-09-07 13:07:23:
用含药血清培养细胞当然可以，但是做出了活性，如果怀疑是代谢物产生的活性，首先应该验检测代谢物是否存在，可以做体外药代研究，比如模拟胃肠道环境以及用肝微粒转化提取物；也可以做体内药代，分析体液，检测化 ...

我的提取物与代谢物可能存在很小的差异，可以用MS得出的分子量来验证吗？因为如果纯化体液，可能需要很大量，有点小难啊！
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3楼2011-09-07 13:52:30
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破土草儿

木虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1): 谢谢！ 2011-09-07 23:00:07
引用回帖:
1楼: Originally posted by bianyu at 2011-09-07 11:28:12:
植物提取物的体内抗纤维化效果还不错，但是对HSC-T6的体外实验一直没有阳性结果，有人建议制备动物血清，然后用血清做细胞试验，看看是不是药物的代谢物在起作用？
请教大家：
（1）这种方法是不是属于药代动力 ...

用含药血清做一下，看是否有效。如果有效，把含药血清上质谱鉴定一下化合物，再对比文献，猜测可能有效的成分（群)，再用该成分的标准品去做体外实验，看是否有效。
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4楼2011-09-07 16:50:58
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