24小时热门版块排行榜    

查看: 1195  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

syn1985

木虫 (正式写手)

[求助] 关于链霉菌文库筛选的困惑 真的好纠结啊

前一段时间在一家公司建了链霉菌的fosmid基因组文库,现在在用自己的特定引物筛选含有目的基因的克隆,筛选发现这个基因几乎是每个保菌板(384孔板)里面都有,我在第一个384孔板里就筛到了6个阳性克隆,其他的都不知道怎么办了,实在是太多了。
这个基因是合成一类化合物里面的一个比较保守的基因,现在我在纠结,因为一个克隆测序要花1-2万,不可能把所有的都测序,但是如果吧所有的都找到然后挑选也很麻烦,因为实在是太多,可是又纠结于自己从已经筛到的6个克隆里面挑一个万一不是我目的化合物的基因那可怎么办?
不知道哪位虫子有好点的主意 ,小妹在此谢过
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shuhua759

捐助贵宾 (著名写手)

先多筛一些,然后提取fosmid质粒,酶切分析各fosmid的关系。然后选择代表性的fosmid进行末端测序。同时先可以敲除这个基因,以验证其的作用。
8楼2012-06-21 18:26:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 syn1985 的主题更新
信息提示
请填处理意见