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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 培养基灭菌前后的差异问题如何解决
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zxmzyu1025

铜虫 (小有名气)

[求助] 培养基灭菌前后的差异问题如何解决 已有1人参与

各位虫友，我采用人工配置培养基，灭菌处理后接种细菌做摇瓶试验，目前遇到的困难是：1培养基中存在葡萄糖，蔗糖，蛋白胨，氯化铵等，灭菌采用115度30min，还是会有表观颜色上的差别 2灭菌前后pH有较大差异，灭菌前7-8，灭菌后基本上10.5左右，这样肯定不利于微生物生长，请问如何解决这一问题
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1楼 2011-09-01 21:31:50
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sero

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

zxmzyu1025(金币+5): 2011-09-02 17:11:52
这样肯定是不行的！！！！葡萄糖是不能和蛋白质在一起灭菌的！！！！！！！！！！！会产生美拉德颜色反应的啊~~！！自己去百度一下褐变反应！！把葡萄糖单独灭。115.20min。其余一起灭，再在操作台混合。
         希望能帮到你！
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将讨厌的变成兴趣！
5楼2011-09-01 22:46:32
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

灭抽滤器，滤膜，试剂瓶，超净台里面抽。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-09-01 21:51:58
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zxmzyu1025

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by brightfuture01 at 2011-09-01 21:51:58:
灭抽滤器，滤膜，试剂瓶，超净台里面抽。

不能用高压蒸汽灭菌这种方法了是么，这样灭菌处理后测出来的COD、氮磷指标应该都比处理前的小吧
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3楼2011-09-01 22:10:29
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

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【答案】应助回帖

zxmzyu1025(金币+5): 2011-09-02 17:11:43
如果要精确分析成分变化的话，需要考虑的一点就是尽量少的改变培养基成分，过滤除菌就是最好的方法。葡萄糖高温会有部分碳化，蛋白胨中含的成分灭菌也难保证不会造成一些蛋白的变性水解，从而改变培养基营养及pH。
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4楼2011-09-01 22:16:44
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