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1289622木虫 (正式写手)
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血浆蛋白沉淀问题
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血样品处理过程，蛋白沉淀与药物提取如何操作，是先沉淀蛋白还是提取药物?若用乙腈沉淀蛋白，乙腈-乙酸乙酯（30:70）提取药物该怎样操作？乙腈-乙酸乙酯（30:70）会溶解蛋白吧？！ 乙腈-乙酸乙酯（30:70）提取药物离心后，上清液要全部取完吗，比如离心后上清液6ml，只取5ml，每次平行操作这样可以吗？ [ Last edited by 1289622 on 2011-9-1 at 17:25 ] |
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11楼2012-04-21 13:06:05
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2楼2011-09-02 22:53:28
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3楼2011-09-04 20:33:49
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【答案】应助回帖
1289622(金币+2, 博学EPI+1): 2011-09-05 17:52:47
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你好，我也不是什么大侠，都是同辈。蛋白沉淀就是把血浆（或者血清）里头的蛋白沉淀下来，方法就是加有机溶剂使蛋白沉淀，“有些情况下”，上清液可以直接上液相（需过滤膜，当然高速离心如一万二可以不过膜，或者吸取上清液干燥复溶，复溶的目的1、萃取，2、增加浓度）。液液萃取就是涡旋离心，使一部分血液内源性物质不萃取，而目标化合物可以萃取在有机相中，原理为有机相是蛋白质变性沉淀，同时根据相似相容原理萃取目标分析物，直接吸取萃取部分上样或者复溶。记住，请回头看，我打引号的有些情况下部分，对于一些物质，直接用蛋白沉淀，内源性杂志很多，导致“基质效应”太大，而单独用液液萃取，可能回收率太低，所以在一些文章中，将液液萃取和蛋白沉淀两者结合起来用。这个我想我说明白了，还不明白自己找一篇中文或者英文的相关文献，看样品制备部分就能够理解我所说的意思了。 对于你第二个问题，你看过药时曲线（血药浓度-时间），只要保证有先上升后下降形状就行，当然由于有些药物分布太快，只能看到下降的部分，那你就尽量早取血，不必拘泥于2min或者5min之类，只要能够保证有上升和下降就好了，当然只有下降部分，也可以。希望你能够明白了！ |
4楼2011-09-04 21:56:33