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江枫与火

金虫 (小有名气)

[求助] 关于PBS缓冲液的配制

请问一下0.1M的pH=7.4的PBS缓冲液怎么配制

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mikewang777

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

江枫与火(金币+2, 博学EPI+1): 2011-08-31 15:46:36
0.1M pH7.4 PBS:称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中,定容到1000ml。如配100ml就缩小10倍!
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2楼2011-08-31 10:37:38
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wangbw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

0.2mol/L(pH7.4)磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffer, PB)
试剂: NaH2PO4•2H2O
Na2HPO4•12H2O
配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
(1)0.2mol/L的 Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4•H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(2)0.2mol/L的 Na2HPO4:称取NaHPO4•12H2O 71.632g(或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2O35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。
(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。
3楼2011-08-31 11:03:44
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江枫与火

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 10:37:38:
0.1M pH7.4 PBS:称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中,定容到1000ml。如配100ml就缩小10倍!

KH2PO4的量正确吗?我在其他地方查0.1M pH7.4 PBS中K2HPO4占62%,KH2PO4占38%的,按这样算的话,KH2PO4的量是不正确的
4楼2011-08-31 16:03:59
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mikewang777

木虫 (小有名气)

应该没错吧,如果是用K2HPO4和KH2PO4,配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。(与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的),以上结果就没有问题,K2HPO4和KH2PO4分子量分别为:174和136。如果K2HPO4含3个结晶水,应该再加上结晶水的重量。
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5楼2011-08-31 18:55:26
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江枫与火

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 18:55:26:
应该没错吧,如果是用K2HPO4和KH2PO4,配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。(与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的),以上结果就没有问题,K2HPO4和KH2PO4分子量分别为:174和136。如果K2HPO4含3个结晶水,应该再加上结 ...

谢谢
6楼2011-08-31 20:18:46
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江枫与火

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 18:55:26:
应该没错吧,如果是用K2HPO4和KH2PO4,配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。(与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的),以上结果就没有问题,K2HPO4和KH2PO4分子量分别为:174和136。如果K2HPO4含3个结晶水,应该再加上结 ...

再请教一下,按缓冲溶液的计算公式算:[H+]=Ka*[共轭酸]/[共轭碱],其中磷酸二氢根的Ka=6.23*10^-8,按这个算的话,它们的配比不是80.2:19.8,你是怎么算出这个比例的
7楼2011-08-31 20:51:27
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