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江枫与火

金虫 (小有名气)

[求助] 关于PBS缓冲液的配制

请问一下0.1M的pH=7.4的PBS缓冲液怎么配制
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1楼 2011-08-31 10:26:31
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mikewang777

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

江枫与火(金币+2, 博学EPI+1): 2011-08-31 15:46:36
0.1M pH7.4 PBS：称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中，定容到1000ml。如配100ml就缩小10倍!
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2楼2011-08-31 10:37:38
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wangbw

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

0.2mol/L（pH7.4）磷酸盐缓冲液（Phosphate Buffer， PB）
试剂： NaH2PO4•2H2O
Na2HPO4•12H2O
配制方法：配制时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。
（1）0.2mol/L的 Na2HPO4；称取Na2HPO4.12H2O 31.2g（或 NaH2PO4•H2O 27.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4•12H2O 71.632g（或 Na2HPO4•7H2O 53.6g或 Na2HPO4•2H2O35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。
（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4•12H2O，充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4~7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。
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3楼2011-08-31 11:03:44
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江枫与火

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 10:37:38:
0.1M pH7.4 PBS：称取13.97g K2HPO4和2.69g KH2PO4溶于蒸馏水中，定容到1000ml。如配100ml就缩小10倍!

KH2PO4的量正确吗？我在其他地方查0.1M pH7.4 PBS中K2HPO4占62%，KH2PO4占38%的，按这样算的话，KH2PO4的量是不正确的
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4楼2011-08-31 16:03:59
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mikewang777

木虫 (小有名气)
应该没错吧，如果是用K2HPO4和KH2PO4，配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。（与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的），以上结果就没有问题，K2HPO4和KH2PO4分子量分别为：174和136。如果K2HPO4含3个结晶水，应该再加上结晶水的重量。
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5楼2011-08-31 18:55:26
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江枫与火

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 18:55:26:
应该没错吧，如果是用K2HPO4和KH2PO4，配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。（与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的），以上结果就没有问题，K2HPO4和KH2PO4分子量分别为：174和136。如果K2HPO4含3个结晶水，应该再加上结 ...

谢谢
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6楼2011-08-31 20:18:46
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江枫与火

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mikewang777 at 2011-08-31 18:55:26:
应该没错吧，如果是用K2HPO4和KH2PO4，配pH7.4的配比应该是80.2:19.8。（与Na2HPO4—NaH2PO4的配比是一样的），以上结果就没有问题，K2HPO4和KH2PO4分子量分别为：174和136。如果K2HPO4含3个结晶水，应该再加上结 ...

再请教一下，按缓冲溶液的计算公式算：[H+]=Ka*[共轭酸]/[共轭碱]，其中磷酸二氢根的Ka=6.23*10^-8,按这个算的话，它们的配比不是80.2:19.8，你是怎么算出这个比例的
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7楼2011-08-31 20:51:27
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