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小欣1211

金虫 (小有名气)

[求助] 总黄酮含量的测定方法

最近要提取中药中的总黄酮,不知道怎么测含量,看了很多说的硝酸铝法,不知道具体操作是怎么样的,还有用芦丁标准品对照,具体的过程是怎样的,哪位大侠能详细的讲讲,不胜感激!

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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呵呵~~
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不论多少次

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
小欣1211(金币+3): 2011-08-31 08:42:58
qinhy(金币+1): 谢谢回复~ 2011-08-31 19:47:01
方法
1.        对照品制备
精密称取芦丁对照品20.8 mg,置于100ml容量瓶中,加70%乙醇使溶解并稀释至刻度,摇匀。
2.样品溶液制备
精密称取样品0.50g,精密加入70%乙醇50ml,称定重量,超声处理30分钟,称定重量,用70%乙醇补足减失重量,即得。
3.标准曲线的制备
  精密称取对照品溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,分别置于25ml比色管中,加70%乙醇置10ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,放置6分钟,加10%硝酸铝溶液1ml ,摇匀,放置6分钟,加1mol/L氢氧化钠溶液10ml,加70%乙醇置刻度,摇匀,放置15分钟。各取10ml置于50ml容量瓶中,用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。
低调做人,高调做事
3楼2011-08-30 21:12:02
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普通回帖

aloneever

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-08-30 00:00:48
找篇文献,照着做就行了。有标准方法就直接用,没有就自己做套方法学考察
2楼2011-08-29 22:27:49
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zcl5027

金虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by 小欣1211 at 2011-08-29 19:41:05:
最近要提取中药中的总黄酮,不知道怎么测含量,看了很多说的硝酸铝法,不知道具体操作是怎么样的,还有用芦丁标准品对照,具体的过程是怎样的,哪位大侠能详细的讲讲,不胜感激!
[ 来自科研家族 [u ...

楼主样品中含有芦丁吗?如果没有或含量很低的话,用芦丁作对照品有点有合适
4楼2011-09-15 22:41:34
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zcl5027 at 2011-09-15 22:41:34:
楼主样品中含有芦丁吗?如果没有或含量很低的话,用芦丁作对照品有点有合适

我不知道有没有芦丁啊   那是合适还是不合适呢
呵呵~~
5楼2011-09-16 09:41:21
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huangweifei

银虫 (初入文坛)

★
karl2100(金币+1): 谢谢! 2011-09-16 23:04:01
我现在也在做总黄酮这块,若你的样品中芦丁含量较低的话,也可以用硝酸铝法的,这是药典中规定的一种测总黄酮的方法,你就找篇文献按照步骤做就行,希望这个答复对你有帮助
6楼2011-09-16 18:04:53
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破土草儿

木虫 (正式写手)

★
karl2100(金币+1): 多谢指教! 2011-09-16 23:04:19
引用回帖:
1楼: Originally posted by 小欣1211 at 2011-08-29 19:41:05:
最近要提取中药中的总黄酮,不知道怎么测含量,看了很多说的硝酸铝法,不知道具体操作是怎么样的,还有用芦丁标准品对照,具体的过程是怎样的,哪位大侠能详细的讲讲,不胜感激!
[ 来自科研家族 [u ...

为了更有可信度,你可以用全波长扫描一下你样品溶液,看最大吸收波长。之后通过文献比对,选择一种和改最大吸收波长差不多的黄酮作为标准品,做曲线。这样可信度就高了。
7楼2011-09-16 21:22:21
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小欣1211

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by huangweifei at 2011-09-16 18:04:53:
我现在也在做总黄酮这块,若你的样品中芦丁含量较低的话,也可以用硝酸铝法的,这是药典中规定的一种测总黄酮的方法,你就找篇文献按照步骤做就行,希望这个答复对你有帮助

我现在用的就是硝酸铝  但是和文献写的有点差距  但是标线效果还不错
呵呵~~
8楼2011-09-17 09:30:22
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平常心11

金虫 (小有名气)

我不知道有没有芦丁啊   那是合适还是不合适呢

     芦丁做对照品不一定被测物也是芦丁呀,芦丁是黄铜类代表成分,显色后测定成分为黄铜的络合物,色谱吸收在510nm正负1nm,黄酮类成分与三氯化铝显色后大部分都类同。但你必须用芦丁作对照品呀,没有对照品你怎么计算含量呀。
9楼2011-12-01 13:35:10
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平常心11

金虫 (小有名气)

我不知道有没有芦丁啊   那是合适还是不合适呢

  还有,你没有芦丁不但没法计算含量,你也没法比较供试品与对照品的相关性。最少你得做个光谱扫描,供试品和对照品有共同的吸收峰才能在最大吸收处去测定吧。
10楼2011-12-01 13:39:22
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