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gloryping铁杆木虫 (小有名气)
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HRP标记DNA 已有1人参与
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| 有没有人做过将HRP标记到DNA上的实验啊？有没有具体步骤啊？ |
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gloryping
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3楼2011-08-25 21:24:35
zsy1106
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励应助 2011-08-25 19:21:03
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+3, BioEPI+1): 鼓励应助 2011-08-25 19:21:03
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标记之后是想做杂交么？凡是涉及到杂交的话，把蛋白标记到HRP的过碘酸钠法恐怕不行，因为单链DNA上的-NH2不能用来标记，这很容易想，因为这样标记容易使整条DNA趴在HRP上，而且-NH2被用掉了，就不能在互补链的配对中形成氢键了。 个人觉得比较好的做法是在DNA和HRP之间搭个“桥”，就是在引物或者探针的末端做修饰，比如可以加个生物素，同时把链亲合素标记到HRP上，然后通过生物素-链亲和素把引物和HRP偶联（换成FITC和FITC的抗体之类的也行）；或者在引物或探针末端修饰-SH，再通过SMCC标记到HRP的-NH2上，方法很多的。看你的实验目的选择最好方案吧。 |
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2楼2011-08-25 17:08:00
gloryping
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4楼2011-08-25 22:18:59