24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1035  |  回复: 5
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看

madengyu

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good!专家辛苦了哦! 2011-08-18 08:59:59
madengyu(金币+2): 2011-08-18 13:14:34
引用回帖:
1楼: Originally posted by madengyu at 2011-08-18 08:10:34:
进行克隆E.coli的蓝白斑筛选,需在LB固体培养基中加X-Gal、IPTG、Amp。请教各位大侠,我买的X-Gal、IPTG、Amp都是固体粉末,怎么加到LB培养基里呢?麻烦各位有没有一个配方呢?我是直接加固体粉末呢?还是先配成一 ...

IPTG说明书给你一个,自己查!见附件!
将X-Gal溶解于二甲基甲酰胺中,浓度操作的话给你一个说明书,见附件;
Amp也是溶解于去离子水中,浓度为50mg/ml;
直接加固体粉末当然不行了;你将三者配好之后,然后按照说明书中说的添加一定量进培养基就可以了;

当然了平时我们都是先将抗生素加入到LB培养基中,然后倒培养基,等到涂布的时候,分别在板子上涂布X-Gal和IPTG的,这样比较方便一点;至于楼主所说的长出来什么样子,长出来有的单克隆是白色的,有的是蓝色的,自己image一下就可以了,不过有些实验是需要白色的单克隆,有些则是需要蓝色的单克隆的!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-18 08:36:15
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlewo7777

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
1949stone(金币+3): 鼓励 2011-08-18 11:06:40
内容已删除
3楼2011-08-18 08:42:07
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anlewo7777

木虫 (正式写手)

4楼2011-08-18 08:42:47
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lloveyr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-08-18 11:06:52
我们做实验的时候几乎从来不用蓝白斑筛选,其实只要你载体和片段的比例合适,板上长出来的几乎就都是阳性克隆,挑选几个做下PCR鉴定根据产物大小来确定是否阳性克隆,然后就可以测序了
5楼2011-08-18 10:38:16
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zt6864594

木虫 (小有名气)

抗性板上能长的基本都是吧,挑几个酶切或PCR鉴定就可以了

而且感觉蓝白斑筛选效果也不怎么样。有时蛮长时间才能显示。还不如直接挑了鉴定
自是人生长恨水长东
6楼2011-08-18 14:38:41
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 madengyu 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +4 hanamiko 2026-03-27 4/200 2026-03-28 04:16 by fmesaito
[考研] 085701环境工程求调剂 +9 多久上课 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:58 by fmesaito
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +10 路痴小琪 2026-03-27 10/500 2026-03-28 03:36 by fmesaito
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 食品工程专硕一志愿中海洋309求调剂 +3 小张zxy张 2026-03-26 5/250 2026-03-27 18:42 by 小张zxy张
[考研] 283求调剂(080500) +4 A child 2026-03-27 4/200 2026-03-27 15:34 by XPU李庆
[考研] 安徽大学专硕生物与医药专业(086000)324分,英语已过四六级,六级521,求调剂 +4 美味可乐鸡翅 2026-03-26 4/200 2026-03-27 15:27 by 星空星月
[考研] 考研化学308分求调剂 +10 你好明天你好 2026-03-23 12/600 2026-03-27 14:43 by shangxh
[考研] 化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-27 14:01 by 杨光于青云
[考研] 085601 材料工程 313分 求调剂 +5 Ong3 2026-03-27 5/250 2026-03-27 12:24 by goldfish51
[考研] 求调剂,一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +4 @taotao 2026-03-26 5/250 2026-03-27 08:10 by hypershenger
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 334分 一志愿武理 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-26 4/200 2026-03-26 16:00 by 不吃魚的貓
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程(085601) +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 0703化学调剂 +4 妮妮ninicgb 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:39 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见