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shuiguoshala

银虫 (小有名气)

[求助] 【求助】+ 多糖甲基化

甲基化方法:
     经P205室温真空干燥的多糖5mg,置于10ml反应瓶中,注入DMSO,充入氮气,磁力搅拌下溶解10min,使样品充分溶解,加入20mg充分干燥的NaOH粉末,氮气保护下,搅拌至大部分NaOH溶解。在氮气保护,避光,冰浴的条件下,缓慢加入0.5mL碘甲烷,室温避光振荡反应30min后,加入2ml水反应终止。将反应液减压旋蒸一定时间后,转入透析袋中自来水对水流透析过夜,透析液冷冻干燥,重复操作3次。
取少量样品两份,一份经105℃干燥,另外一份经P205室温真空干燥后进行红外光谱检测,若3600-3200cm-1处的O-H宽峰消失,说明甲基化完全,否则需重复甲基化。

我做了6次还没有完全甲基化,而且不同干燥条件下的红外图谱明显不同,不知道实验方法哪里还需要改进的,甲基化高手啊,请帮帮我吧!
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dnazyme

捐助贵宾 (知名作家)

老虫

【答案】应助回帖

有的多糖在DMSO中溶解度低,也影响甲基化难易程度。
博坊生物
7楼2012-05-19 11:33:28
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shuiguoshala

银虫 (小有名气)

好着急 好着急  大家帮我顶一下
2楼2011-08-20 09:35:03
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408848307

金虫 (正式写手)

帖子真精彩!
已经收录到淘贴专辑《糖化学及实验技能
3楼2011-09-05 17:25:48
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shuiguoshala

银虫 (小有名气)

为什么没人回我呀
5楼2011-11-15 10:33:52
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