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shuiguoshala银虫 (小有名气)
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【求助】+ 多糖甲基化
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甲基化方法: 经P205室温真空干燥的多糖5mg,置于10ml反应瓶中,注入DMSO,充入氮气,磁力搅拌下溶解10min,使样品充分溶解,加入20mg充分干燥的NaOH粉末,氮气保护下,搅拌至大部分NaOH溶解。在氮气保护,避光,冰浴的条件下,缓慢加入0.5mL碘甲烷,室温避光振荡反应30min后,加入2ml水反应终止。将反应液减压旋蒸一定时间后,转入透析袋中自来水对水流透析过夜,透析液冷冻干燥,重复操作3次。 取少量样品两份,一份经105℃干燥,另外一份经P205室温真空干燥后进行红外光谱检测,若3600-3200cm-1处的O-H宽峰消失,说明甲基化完全,否则需重复甲基化。 我做了6次还没有完全甲基化,而且不同干燥条件下的红外图谱明显不同,不知道实验方法哪里还需要改进的,甲基化高手啊,请帮帮我吧! |
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