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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC和GC中如何建立自己的方法啊
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小珍珍

铜虫 (小有名气)

[交流] HPLC和GC中如何建立自己的方法啊

请教大家，在没有参考文献的情况下，采用高效液相色谱和气相色谱中如何建立自己的方法啊，比如柱子怎么选择，色谱条件如何确定，流动相怎么去选择啊？
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1楼 2011-08-14 13:32:07
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totoyoyo1997

银虫 (正式写手)
★ ★
小珍珍(金币+1):谢谢参与
qinhy(金币+1): 多谢应助回帖~ 2011-08-16 18:42:50
先进行全波长扫描，找到最大吸收。根据选择波长，有分子式结构和极性选择确定流动相用甲醇或乙腈，之后根据类似品种再选择是否需要增加缓冲盐？最好用二极管阵列全波长检测，能有效分析检测前后杂质分离情况，再逐步摸索最优的检测条件
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4楼2011-08-16 11:54:05
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gwmgyp

版主 (知名作家)
★ ★
小珍珍(金币+1):谢谢参与
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-08-15 10:35:12
引用回帖:
1楼: Originally posted by 小珍珍 at 2011-08-14 13:32:07:
请教大家，在没有参考文献的情况下，采用高效液相色谱和气相色谱中如何建立自己的方法啊，比如柱子怎么选择，色谱条件如何确定，流动相怎么去选择啊？

先看待分析化合物的结构，以以往做其它化合物分析条件的经验，先采用手头普通的碳十八柱或碳八柱，以甲醇水、乙腈水系统试试主峰的出峰时间早晚及与其它杂质的分离情况，然后根据以上得到的信息，进行摸索优化，有关物质尽可能用梯度的方法来进行检测。
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2楼2011-08-14 15:24:20
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whzzy

金虫 (小有名气)
★ ★
小珍珍(金币+1):谢谢参与
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-08-17 21:29:45
GC方法：先了解样品及待测成分信息，根据溶解度、极性、沸点等选择溶媒和柱子，再开发方法，主要看分离，分离好了再考虑回收。基质效应等
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3楼2011-08-16 10:14:33
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小珍珍(金币+1):谢谢参与
wtf66(金币+2): 谢谢提供 2011-08-20 00:15:19
建议看看一本名叫《实用高效液相色谱法的建立》这本书，如何建立方法，如何选择色谱柱，流动相什么的，讲的很全，有翻译成汉语的
作者：L.R.施耐德,J.L.格莱吉克,J.J.柯克兰
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5楼2011-08-17 20:00:30
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wumingyue20012楼
2011-08-21 19:14   回复  
wtf66: 请勿灌水 2011-08-23 22:54:41
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