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做薄层分析时,展开剂需要怎么饱和?
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做薄层分析时,需要用展开剂饱和20~30min左右。 是先把展开剂倒入层析缸,饱和好后,再迅速把板放入层析缸, 还是在双槽层析缸的一侧放上展开剂,另一侧放上板(这一侧不放一点展开剂,保持干燥),饱和好后,小心地将展开剂倾倒在放有板的一侧,进行展开! 哪种操作是正确的,还是皆可? 请大家赐教!谢谢 |
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饱和分为2部分: 1、展开缸的饱和:在展开之前,使展开剂蒸汽在展开缸内饱和,使展开缸汽液状态达到一定的稳定状态,此时尚未放薄层板。 2、薄层板的饱和:在展开缸饱和后,放入已经点样完毕的薄层板,进行饱和,此时薄层板不接触展开剂的,使薄层板整体差异性减小。 哪些条件下需要饱和: 1、展开剂含低沸点的:如展开剂含石油醚(30-60,60-90)、乙醚等; 2、展开剂组成比较复杂的:如3-4种有机试剂; 3、展开剂是水饱和后或有机试剂饱和水的:有如正丁醇饱和的水或水饱和正丁醇,尤其是在做皂苷类分离的时候,很重要; 4、展开缸大小与薄层板大小差异大的:一般缸大于板宽度的3倍,高度2倍的 5、平行样品点多:如一块板点5个以上的样品点;; 6、其它发生边缘效应的…… 关于饱和时间:根据展开剂而定。 1、展开剂组分极性差异不大的且挥发性好的,时间可以短一些,一般15-20分钟即可; 2、极性差异大的,且挥发性差异大的,时间要长一些,一般要30-60分钟; 3、极性差异大的,且挥发性差异不大的,时间要长一些,一般要20-30分钟; 4、极性差异不大,且挥发性差不大的,时间可以短一些,一般要10-15分钟; 5、水饱和有机试剂或有机试剂饱和水的,时间一般都比较长,30-60分钟。 6、另外,大家打开关闭展开缸的速度要快,放板取板的速度也要快,否则预饱和的效果全被你后期的操作给抹杀了!! 不足之处,请多海涵 |
12楼2011-08-13 08:14:49
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yilishanshan(金币+1): 谢谢,可否相告为什么展开之前要用三乙胺熏? 2011-08-12 00:18:10
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yilishanshan(金币+1): 谢谢,可否相告为什么展开之前要用三乙胺熏? 2011-08-12 00:18:10
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2楼2011-08-09 21:02:49
3楼2011-08-10 10:58:36
4楼2011-08-10 12:47:13
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