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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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DXY1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 希望继续交流 2011-08-08 18:17:41
暗夜懒猫(金币+1): 2011-08-25 08:14:07
用菌液做PCR不是很可靠,因为在菌液中除了你的目的基因外,还有其他的基因,你不能保证你的引物只会扩增出你的目的基因,也会扩增出其他的基因,除非你把菌的整个基因组都测序一遍,确定你的引物就只会扩增你的目的基因。
用菌液做PCR一般是运用于槽式PCR,你把质粒提出再做PCR,看看结果
11楼2011-08-08 15:04:50
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lhl0538

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-08-08 18:17:50
质粒的凝胶电泳条带不是一条,因为质粒有不同的存在形式。
12楼2011-08-08 15:19:55
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by wzqno at 2011-08-08 14:55:31:
加样孔在下面,那最上面的是引物二聚体吧,可能就是因为引物特异性不好,所以剩余的引物形成二聚体了,不过既然之前PCR克隆基因的时候都没问题,这就比较费解了

引物二聚体我看到了,你仔细看一下图,中间好几个点样孔还有两条带
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
13楼2011-08-08 23:29:56
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暗夜懒猫

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-08 11:28:08:
这种情况我很少遇到,不过你可以进一步进行一下提质粒,然后双酶切验证一下;
或者重新进行连接,然后进行PCR验证,不过按照你图中那些条带应该都是你选取的样进行PCR的吧?我就很奇怪了,为什么P出来的大小基本 ...

酶切验证后也无想要的片段,难道是连接失败了,那板上出的假阳性也太多了,假阳性产生的原因是什么啊,怎么避免啊。
14楼2011-08-13 18:41:35
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