应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题
182/2返回列表上一页12
查看: 5140  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qingdee

新虫 (小有名气)
★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-22 17:35:43
好奇怪啊 ，各实验室的方法不尽相同，
我实验室里边的转基因体系侵染液OD600=0.2，
赞一下(1人) 回复此楼
11楼2011-12-22 14:15:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

A406

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★
jhu132llh(金币+3): 鼓励积极应助 2011-12-22 17:35:48
一般愈伤在不加抗性筛选剂上分化至少有7成以上，材料好坏是关键，材料好坏不仅与培养基有关，更和培养环境有关，早期的愈伤分化比后期的要好。OD0.3——0.6都可以，
赞一下(1人) 回复此楼
12楼2011-12-22 16:07:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinxiaoyi

铁虫 (初入文坛)
★
jhu132llh(金币+1): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:34:03
我们实验室一般暗培养，但光培养的愈伤长的更致密点，看起来舒服，至于到后面的过程貌似效果差不多。
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2011-12-23 12:13:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)
★
jhu132llh(金币+1): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:54
b别信日本人，那个说40天拿到苗的人，我跟他交流过，还是有很多trick在里面的，我当时也是重复不出来的。暗陪和光下都可以的，主要是能诱导愈伤的还是培养基的成分。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2011-12-26 22:35:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿德54007

金虫 (正式写手)
★
jhu132llh(金币+1): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:49
引用回帖:
5楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-10 19:24:47:
非常感谢。实验方法是师姐留下来的方案，培养基配方啊，培养的过程，但是文献中报道的方法各有差异，比方说开始诱导愈伤时采用NB培养基，有的则用N6，分化培养基所加激素也不同，关键就是激素的比例，到底哪种比 ...

我以前做玉米愈伤组织，发现不同品种玉米的愈伤组织对同一种培养基的反应不一样。有的诱导或分化效果很好，有的效果就很差。所以这个配方不是万能的。
赞一下(1人) 回复此楼
阳光温热，岁月静好，你还没来，我怎敢老
15楼2011-12-27 20:44:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

419249049

木虫 (正式写手)
★ ★
SongQ5285(金币+2): 有些道理 2012-01-05 17:28:05
引用回帖:
1楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-06 18:23:36:
虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个 ...

所以你不能指望大家给你一个确定的答案，因为做转基因的外植体材料基本上都不一样，即使同样是水稻品种种源也存在差异，所以无法确定OD值是0.5还是0.6抑或是0.8，还有关于继代培养几次的问题这个你要去做实验解决这个问题，上面也说了，不同的材料都不一样。别人的实验结果应该只能是你的参考，而不能作为你的答案。如果你有答案了，那要你还做什么啊？所以楼主还是要做实验的，祝你成功！
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2011-12-31 18:39:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ychen0530

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
SongQ5285(金币+3): 经验很重要，多思考，多交流，多试验 2012-01-05 17:28:42
1.影响分化率的因素很多，对于楼主所反映的问题不好一概而论。这里分享我们实验室作转基因的一些tricks:从共培养转筛选时，先将愈伤组织在只含有头孢的培养基中培养5天左右，然后再将状态好的愈伤组织转入含有筛选压力的培养基中，目的是给转入的抗性基因一个表达的时间，最大限度避免假阴性结果；转基因中使用的培养基在倒好平板凝固后在超净工作台中透干水汽，相对干燥的培养环境有利于愈伤组织的生长和分化；
2.我们的分化时间同样比较长，分化阶段的愈伤组织在5个月的时间里都有陆续分化的现象，求解释；
3.我的侵染液浓度是0.1，我师姐做过更低的，0.02，效果都很好，转化率均在85%以上
4.我们只用继代2次以内的愈伤组织
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2012-01-05 11:12:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

朗朗星宇

铁虫 (初入文坛)
我们的菌体OD值0.4~0.5，好运
赞一下 回复此楼
18楼2013-04-09 22:26:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 嫘诺 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:47 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 5lbyq5wrhb 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:46 by vs90ilomwc
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 5/250 2026-02-08 08:32 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +3 3rkserf6qr 2026-02-07 4/200 2026-02-08 08:27 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:26 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +5 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:12 by vs90ilomwc
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 6/300 2026-02-08 08:07 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 08:06 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 7/350 2026-02-08 07:52 by vs90ilomwc
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:32 by vs90ilomwc
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:27 by vs90ilomwc
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全 +4 2h7du0nuhk 2026-02-07 8/400 2026-02-08 07:26 by vs90ilomwc
[硕博家园] 博士延得我，科研能力直往上蹿 +8 偏振片 2026-02-02 8/400 2026-02-08 06:52 by liyeqik
[教师之家] 有院领导为了换新车，用横向课题经费买了俩车 +7 瞬息宇宙 2026-02-04 7/350 2026-02-07 21:47 by tfang
[有机交流] 酰胺脱乙酰基 10+5 chibby 2026-02-03 12/600 2026-02-07 19:29 by 江东闲人
[基金申请] 同年申请2项不同项目，第1个项目里不写第2个项目的信息，可以吗 +4 hitsdu 2026-02-06 4/200 2026-02-07 13:07 by jurkat.1640
[基金申请] 有时候真觉得大城市人没有县城人甚至个体户幸福 +9 苏东坡二世 2026-02-04 10/500 2026-02-07 12:37 by 小毛球
[考博] 天津大学招2026.09的博士生，欢迎大家推荐交流（博导是本人） +4 a793625982 2026-02-05 5/250 2026-02-07 10:57 by a793625982
[公派出国] CSC & MSCA 博洛尼亚大学能源材料课题组博士/博士后招生｜MSCA经费充足、排名优 +4 雨念 2026-02-01 6/300 2026-02-06 23:32 by MelissaPon
[教师之家] 遇见不省心的家人很难过 +18 otani 2026-02-03 22/1100 2026-02-04 11:06 by tangmnt
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭