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_然然

金虫 (正式写手)

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[求助] 培养DC过程中，配制GM-CSF和IL-4的问题，谢谢

培养DC，新买的GM-CSF和IL-4怎么配制？
说明书上说用水配制，为了是保持持久加0.1%BSA。有很多疑问呀？望指教！
水应该是高压过的三蒸水或超纯水吧，配置后还用0.22um过滤吗？怎么确保无菌？
还有加BSA，冰箱里-20冻存的好长时间的BSA能用吗？
0.1%BSA怎么加？100ml液体加0.1mlBSA还是99.9ml液体加0.1mlBSA？

十分感谢！

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1楼2011-08-05 20:01:18

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lucky0571

铜虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢应助~祝顺利！ 2011-08-16 16:27:13
_然然(金币+2): 谢谢请问有在养DC吗？ 2011-08-17 08:57:09

培养细胞最好用超纯水啦，用Milliq产生的拿种超纯水，冰箱里-20冻存的好长时间的BSA应该是能用的，但是前提是这些BSA是有质量保证和明确的产地来源，也就是说是谁分装的，哪个公司生产的，之前有没有用过做类似的试验，如果都确实的话，应该是可以用的，我们实验室曾经用过两三年前师姐用剩下的血清，培养细胞是没有问题的。99.9ml液体加0.1mlBSA这样配成即0.1%BSA。超纯水的最后一步是过0.22微米滤膜的，为了保证，最好是将水再过一次摸，然后在超净台内完成0.1%BSA的配制。