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cloverplm

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★
1949stone(金币+1): 有道理 2011-08-06 11:48:26

最好再给出模板的序列，分析结果能更准确。也可以用Prmier Select， primer 来评估。

净——静——竞——进

2楼2011-08-04 21:50:23

madengyu

禁虫 (小有名气)

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3楼2011-08-04 21:59:41

空谷幽风

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dhd997(金币+2): good 2011-08-05 08:08:56

引物的保护碱基不要设计三个相同的碱基，尤其像三个C或者G，另外保护碱基最好设计5个，因为PCR扩增在5‘是很容易丢掉1-2碱基的，那样你的酶切位点很容易切不开

a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?

4楼2011-08-04 23:47:17

86964109

木虫 (小有名气)

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madengyu(金币+2): 2011-08-05 09:10:01

oligo评测错误引发比较严重，超出评分标准

赞一下

5楼2011-08-05 09:06:16

madengyu

禁虫 (小有名气)

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6楼2011-08-05 09:24:26

天使托

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dhd997(金币+5, MolEPI+1): good 2011-08-05 10:44:33

三个保护碱基没有必要完全加C，可以GCAT混加，当然了这要看你的引物序列的GC含量和Tm值了；
引物1 cccgaattcatgaggttcactttgatcg
引物2 cccaagcttttagtgaacagtaggcag

这两条引物我分析了一下，是可以用的，只不过第一条引物的Tm值稍微有些高，你可以把前面保护碱基改成A或者T，这个无所谓的；
看图：（分析软件：invitrogen vector NTI）

第一条引物

第二条引物

两条引物共同分析！

Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!

7楼2011-08-05 10:29:32

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1949stone(金币+5): 鼓励很好 2011-08-06 11:49:08

上传好麻烦，文件1是Primer5 检测结果，2是oligo评测结果，希望对楼主有帮助

8楼2011-08-05 11:54:15