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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 工艺技术 » 学习分享 » 黄酮纯化分离时，有关硅胶柱层析的问题
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wpskya

新虫 (初入文坛)

[交流] 黄酮纯化分离时，有关硅胶柱层析的问题

本人最近做黄酮，分离纯化实验，正打算做硅胶柱层析，现有如下问题请教各位。忘高手指点。问题如下：
1，硅胶怎样活化？
2，洗脱剂氯仿与甲醇比例如何？梯度洗脱比例，是怎样一个梯度？
3，如果有具体操作流程就好了。
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1楼 2011-08-04 15:09:05
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mlnjut

铜虫 (知名作家)
★
wpskya(金币+1):谢谢参与
和我一届的一个同学做的就是黄酮，晚上回去找找看~~
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2楼2011-08-04 15:18:39
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249367652

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
wpskya(金币+1):谢谢参与
mlnjut(金币+2): 鼓励回帖~~ 2011-08-05 09:15:45
本人也在做，就用聚酰胺粉过柱，效果很好啊。用苯洗脱去杂，再用甲醇洗脱，定容。
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3楼2011-08-04 17:09:28
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tangbohejin

木虫之王 (文学泰斗)
★ ★
wpskya(金币+1):谢谢参与
mlnjut(金币+1): 鼓励交流~ 2011-08-05 09:15:53
这个很麻烦。。
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4楼2011-08-04 23:43:04
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四维622

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
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mlnjut(金币+2): huanyingjiaoliu 2011-08-07 08:36:03
黄酮用Sephadex™ LH-20来分比较好。国外专门有一本书对这个有介绍《Preparative Gel Chromatography on Sephadex LH-20》。
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5楼2011-08-06 21:14:48
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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mlnjut(金币+2): 2011-08-07 08:36:07
LH-20+RP-18 HPLC 搞定.
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6楼2011-08-07 00:52:16
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vincent163

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
ljason(金币+2): 鼓励应助交流 2011-08-08 11:51:35
硅胶活化：120摄氏度烘3~4h
洗脱条件用薄层硅胶板寻找~~RF值控制在0.02~0.05
梯度洗脱的设置梯度要缓和~~
根据样品在洗脱条件的溶解性选择是干法还是湿法~~
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7楼2011-08-07 22:39:23
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netsking

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
ljason(金币+1): 鼓励讨论。 2011-08-08 11:51:45
引用回帖:
7楼: Originally posted by vincent163 at 2011-08-07 22:39:23:
硅胶活化：120摄氏度烘3~4h
洗脱条件用薄层硅胶板寻找~~RF值控制在0.02~0.05
梯度洗脱的设置梯度要缓和~~
根据样品在洗脱条件的溶解性选择是干法还是湿法~~

硅胶柱吸咐太大, 上一克样品, 下来可能是有60%.
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8楼2011-08-08 02:20:55
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vincent163

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
8楼: Originally posted by netsking at 2011-08-08 02:20:55:
硅胶柱吸咐太大, 上一克样品, 下来可能是有60%.

或者用聚酰胺试试~~
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9楼2011-08-08 12:48:24
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echo663

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
ljason(金币+1): 额，鼓励应助交流。 2011-08-09 09:00:39
硅胶对黄酮的吸附很严重，最好是用聚酰胺粗分
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10楼2011-08-09 07:43:33
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