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shuaige123

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA的长度?

我用逆转录的mRNA逆转录成cDNA,然后以cDNA为模板进行实时定量,请问有什么办法可以知道我逆转录的cDNA的长度?哪位仁兄知道,麻烦告诉我一声,谢谢!
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shuaige123

新虫 (初入文坛)

dhd997: 欢迎多来交流哦 2011-08-07 15:25:49
谢谢各位仁兄了!其实当时做实验的实验的时候也没想知道cDNA的长度,只是有个审稿的老师忽然问了一个这样的问题,搞的我摸不着头脑,这才麻烦大家了!谢谢各位仁兄了,又学了不少东西!谢谢了!
7楼2011-08-07 12:37:26
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查看全部 7 个回答

jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 很活跃,鼓励交流 2011-08-04 16:38:16
shuaige123(金币+3): 2011-08-05 12:18:11
引用回帖:
1楼: Originally posted by shuaige123 at 2011-08-04 14:12:43:
我用逆转录的mRNA逆转录成cDNA,然后以cDNA为模板进行实时定量,请问有什么办法可以知道我逆转录的cDNA的长度?哪位仁兄知道,麻烦告诉我一声,谢谢!

这个问题不好回答,因为逆转录反应的影响因素很多,包括逆转录酶的活性、模板的浓度等等,一般的逆转录产物为1-2kb。
2楼2011-08-04 14:45:52
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shuaige123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-04 14:45:52:
这个问题不好回答,因为逆转录反应的影响因素很多,包括逆转录酶的活性、模板的浓度等等,一般的逆转录产物为1-2kb。

一般要测cDNA的长度有哪几种办法?谢谢
3楼2011-08-05 12:17:48
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空谷幽风

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-08-07 15:25:03
这个长度真的没法估计,反转录用的方法不一样得到的cDNA长度也会不一样,要想得到准确长度只能测序,从3‘端polyA一段段的往前测,说说你为什么想知道cDNA的长度,咱们可以先考虑一下有没有这个必要
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-08-05 12:46:50
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