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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA的长度？
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shuaige123

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA的长度？

我用逆转录的mRNA逆转录成cDNA，然后以cDNA为模板进行实时定量，请问有什么办法可以知道我逆转录的cDNA的长度？哪位仁兄知道，麻烦告诉我一声，谢谢！
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1楼 2011-08-04 14:12:43
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 很活跃，鼓励交流 2011-08-04 16:38:16
shuaige123(金币+3): 2011-08-05 12:18:11
引用回帖:
1楼: Originally posted by shuaige123 at 2011-08-04 14:12:43:
我用逆转录的mRNA逆转录成cDNA，然后以cDNA为模板进行实时定量，请问有什么办法可以知道我逆转录的cDNA的长度？哪位仁兄知道，麻烦告诉我一声，谢谢！

这个问题不好回答，因为逆转录反应的影响因素很多，包括逆转录酶的活性、模板的浓度等等，一般的逆转录产物为1-2kb。
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2楼2011-08-04 14:45:52
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shuaige123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-04 14:45:52:
这个问题不好回答，因为逆转录反应的影响因素很多，包括逆转录酶的活性、模板的浓度等等，一般的逆转录产物为1-2kb。

一般要测cDNA的长度有哪几种办法？谢谢
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3楼2011-08-05 12:17:48
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-08-07 15:25:03
这个长度真的没法估计，反转录用的方法不一样得到的cDNA长度也会不一样，要想得到准确长度只能测序，从3‘端polyA一段段的往前测，说说你为什么想知道cDNA的长度，咱们可以先考虑一下有没有这个必要
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
4楼2011-08-05 12:46:50
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)
如果是已知序列的cDNA，克隆测序就可以了；如果是未知基因，不知道能不能通过建库的方法。
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5楼2011-08-05 12:51:59
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cloverplm

金虫 (小有名气)
这个问题不简单呢。cDNA是环状双链的，实在木有办法，你就只能去测序啦！
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净——静——竞——进
6楼2011-08-05 23:00:06
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shuaige123

新虫 (初入文坛)
dhd997: 欢迎多来交流哦 2011-08-07 15:25:49
谢谢各位仁兄了！其实当时做实验的实验的时候也没想知道cDNA的长度，只是有个审稿的老师忽然问了一个这样的问题，搞的我摸不着头脑，这才麻烦大家了！谢谢各位仁兄了，又学了不少东西！谢谢了！
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7楼2011-08-07 12:37:26
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