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小酒窝7988

银虫 (小有名气)

[求助] 关于色谱中的进样环

最近在做HPLC,不过我是用伯乐层析仪来代替液相做实验的,由于缺少进样环就用50微升的进样环(而我参考的文献都是用10或者20微升的),这对我的实验结果会有很大影响吗?会不会使混合标准样的各个峰很胖分不开?我实验做过一次混标里本来有5种物质,可是实际就出了个三重峰,而且相互叠在一起(如附件图所示),不知道到底是流动相或者是柱子不合适,还是环更不合适所致呢?
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IMB2009

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

5个物质只分了3个 还叠杂一起了 是没有分开 应该和你进样体积有关系的 不改变进样体积的情况下你试试前面的办法:
1.调整流动相的极性
2.调整流速
3.可以尝试梯度或者线性洗脱方式
8楼2011-08-04 10:02:26
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shelly8059

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小酒窝7988(金币+2): 2011-08-04 16:49:29
小酒窝7988(金币+8): 2011-08-04 16:50:10
应该不是定量环的问题。样品含量做线性时,可以采用增加进样体积来增加浓度,我们采用的是自动进样器,我进的最大体积为70微升,峰型,峰展宽正常。安捷伦还有100微升的定量环呢。你这个是流动相和色谱柱没有使物质完全分离。
海阔凭鱼跃,天高任鸟飞!
2楼2011-08-03 13:51:31
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

小酒窝7988(金币+8): 2011-08-04 16:50:15
你的问题和定量环无关,可以考虑调整一下流动相
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
3楼2011-08-03 14:15:08
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pcec

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

色谱条件需要进一步优化!
4楼2011-08-03 16:33:41
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