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[求助]
【求助】胰岛素的液相问题
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各位虫友,我现在需要做高效液相检测胰岛素,2010版中国药典的方法如下:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5~10μm);0.2mol/L硫酸盐缓冲液(取无水硫酸钠28.4g,加水溶解后,加磷酸2.7ml,乙醇胺调节pH值至2.3,加水至1000ml)-乙腈(74∶26)为流动相,柱温为40℃;检测波长为214nm。 我有以下3个问题: 1.关于0.2mol/L硫酸盐缓冲液配制,是不是错了,应该先定容1000ml,再调节pH? 2.关于色谱柱,文献中大多采用ODS柱,实验室的色谱柱为Hipersil BDS C18柱,我是否能用? 3.查到Hipersil BDS C18的pH适用范围为2-9,如果流动相中0.2mol/L硫酸盐缓冲液的pH为2.3,对柱子的损害性较大吗? 希望虫友能够帮忙解答,谢谢 |
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