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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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小小lyq

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】胰岛素的液相问题

各位虫友,我现在需要做高效液相检测胰岛素,2010版中国药典的方法如下:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5~10μm);0.2mol/L硫酸盐缓冲液(取无水硫酸钠28.4g,加水溶解后,加磷酸2.7ml,乙醇胺调节pH值至2.3,加水至1000ml)-乙腈(74∶26)为流动相,柱温为40℃;检测波长为214nm。
我有以下3个问题:
1.关于0.2mol/L硫酸盐缓冲液配制,是不是错了,应该先定容1000ml,再调节pH?
2.关于色谱柱,文献中大多采用ODS柱,实验室的色谱柱为Hipersil BDS C18柱,我是否能用?
3.查到Hipersil BDS C18的pH适用范围为2-9,如果流动相中0.2mol/L硫酸盐缓冲液的pH为2.3,对柱子的损害性较大吗?
希望虫友能够帮忙解答,谢谢
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xiaohu_515

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


qinhy(金币+1): 多谢应助~~ 2011-08-01 18:32:47
小小lyq(金币+3): 谢谢 2011-08-07 09:07:28
我通常的操作是先定容然后调pH;至于BDS色谱柱,我没用过,不过据说适用于测定碱性化合物,你可以试一试在该色谱条件下药物峰形如何,我用药典条件ODS色谱柱峰形良好,保留时间6-7分钟;BDS色谱柱耐酸性良好,pH2.3应该没问题
2楼2011-08-01 10:50:01
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小小lyq

新虫 (初入文坛)

补充问下,你所用的色谱条件是参照10版药典条件吗?因为我看到10版与05版的条件有所不同
3楼2011-08-01 15:21:38
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王--欢

新虫 (初入文坛)

我们也在做胰岛素,我只会回答第一个问题,流动相确实是那么配,先调pH值再定容至刻度,没有错
4楼2012-06-29 17:28:29
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夏微凉0905

金虫 (小有名气)

引用回帖:
1628679楼: Originally posted by 王--欢 at 2012-06-29 17:28:29
我们也在做胰岛素,我只会回答第一个问题,流动相确实是那么配,先调pH值再定容至刻度,没有错

那稀释后,pH值不会变化么?
加油!
5楼2012-09-28 20:52:43
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