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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药典 » 【求助】胰岛素的液相问题
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小小lyq

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】胰岛素的液相问题

各位虫友，我现在需要做高效液相检测胰岛素，2010版中国药典的方法如下：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（5～10μm）；0.2mol/L硫酸盐缓冲液（取无水硫酸钠28.4g，加水溶解后，加磷酸2.7ml，乙醇胺调节pH值至2.3，加水至1000ml）-乙腈（74∶26）为流动相，柱温为40℃；检测波长为214nm。
我有以下3个问题：
1.关于0.2mol/L硫酸盐缓冲液配制，是不是错了，应该先定容1000ml，再调节pH？
2.关于色谱柱，文献中大多采用ODS柱，实验室的色谱柱为Hipersil BDS C18柱，我是否能用？
3.查到Hipersil BDS C18的pH适用范围为2-9，如果流动相中0.2mol/L硫酸盐缓冲液的pH为2.3，对柱子的损害性较大吗？
希望虫友能够帮忙解答，谢谢
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1楼 2011-07-31 11:12:16
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xiaohu_515

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
qinhy(金币+1): 多谢应助~~ 2011-08-01 18:32:47
小小lyq(金币+3): 谢谢 2011-08-07 09:07:28
我通常的操作是先定容然后调pH；至于BDS色谱柱，我没用过，不过据说适用于测定碱性化合物，你可以试一试在该色谱条件下药物峰形如何，我用药典条件ODS色谱柱峰形良好，保留时间6-7分钟；BDS色谱柱耐酸性良好，pH2.3应该没问题
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2楼2011-08-01 10:50:01
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小小lyq

新虫 (初入文坛)
补充问下，你所用的色谱条件是参照10版药典条件吗？因为我看到10版与05版的条件有所不同
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3楼2011-08-01 15:21:38
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王--欢

新虫 (初入文坛)
我们也在做胰岛素，我只会回答第一个问题，流动相确实是那么配，先调pH值再定容至刻度，没有错
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4楼2012-06-29 17:28:29
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夏微凉0905

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1628679楼: Originally posted by 王--欢 at 2012-06-29 17:28:29
我们也在做胰岛素，我只会回答第一个问题，流动相确实是那么配，先调pH值再定容至刻度，没有错

那稀释后，pH值不会变化么？
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加油！
5楼2012-09-28 20:52:43
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