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小小lyq

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】胰岛素的液相问题

各位虫友,我现在需要做高效液相检测胰岛素,2010版中国药典的方法如下:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(5~10μm);0.2mol/L硫酸盐缓冲液(取无水硫酸钠28.4g,加水溶解后,加磷酸2.7ml,乙醇胺调节pH值至2.3,加水至1000ml)-乙腈(74∶26)为流动相,柱温为40℃;检测波长为214nm。
我有以下3个问题:
1.关于0.2mol/L硫酸盐缓冲液配制,是不是错了,应该先定容1000ml,再调节pH?
2.关于色谱柱,文献中大多采用ODS柱,实验室的色谱柱为Hipersil BDS C18柱,我是否能用?
3.查到Hipersil BDS C18的pH适用范围为2-9,如果流动相中0.2mol/L硫酸盐缓冲液的pH为2.3,对柱子的损害性较大吗?
希望虫友能够帮忙解答,谢谢
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王--欢

新虫 (初入文坛)

我们也在做胰岛素,我只会回答第一个问题,流动相确实是那么配,先调pH值再定容至刻度,没有错
4楼2012-06-29 17:28:29
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