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空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good!对上面的很好的补充! 2011-07-22 12:17:49
变性聚丙烯酰胺电泳buffer里面含尿素等变性剂 pcr产物dna双链会解离成为单链

非变性电泳不会解链 dna以双链形式电泳
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
11楼2011-07-22 10:14:32
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by changes at 2011-07-21 22:05:02:
非变性胶也可以,但是分辨率会低些。另外,你是用SRAP标记做什么的,多态性还是标记目的基因或遗传图谱构建?

多态性。一种观赏花卉50个品种的遗传多样性分析
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
12楼2011-07-22 13:43:13
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-07-22 10:07:55:
...额~~话说我们一般都是把丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺配成40%的母液,用的时候根据所需要的浓度加一定量的母液即可。要是每次都搞丙烯酰胺来配,那谁受得了啊。。。

你理解有误,我们说的就是指母液,不知道你怎么理解成这样了
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
13楼2011-07-22 13:45:20
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-22 13:45:20:
你理解有误,我们说的就是指母液,不知道你怎么理解成这样了

不知道是哪里的问题啊...如果我理解不对的话,那么冼亮淀粉酶大大说的:“APS和TEMED虽然不好,但也比不上丙烯酰胺有神经毒性,可随皮肤渗入人体,所以我是什么东西都加完之后最后加丙烯酰胺。” 意思难道是所有东西都加好,最后再取母液吗??这种配胶的顺序到是蛮新奇的...
14楼2011-07-22 14:22:54
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changes

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): 很有经验 2011-07-22 16:55:45
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-22 13:43:13:
多态性。一种观赏花卉50个品种的遗传多样性分析

多态性的话建议使用变性胶检测,使用大板、长板,那样跑出来相当漂亮,也方便统计条带。
另外,材料的亲缘关系最好也明确,对于最终结果的分析有帮助。
15楼2011-07-22 14:49:22
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-07-22 14:22:54:
不知道是哪里的问题啊...如果我理解不对的话,那么冼亮淀粉酶大大说的:“APS和TEMED虽然不好,但也比不上丙烯酰胺有神经毒性,可随皮肤渗入人体,所以我是什么东西都加完之后最后加丙烯酰胺。” 意思难道是所 ...

他是简略回答好不好,就是指母液啦
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
16楼2011-07-22 15:54:39
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墨池

银虫 (小有名气)

西瓜: google,百度,搜搜,有道,必应…… 2011-07-22 17:10:11
引用回帖:
Originally posted by changes at 2011-07-22 14:49:22:
多态性的话建议使用变性胶检测,使用大板、长板,那样跑出来相当漂亮,也方便统计条带。
另外,材料的亲缘关系最好也明确,对于最终结果的分析有帮助。

变性胶的配方有么?可否参考一下下(*^__^*) 嘻嘻……
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
17楼2011-07-22 15:55:33
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微明

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
559054楼: Originally posted by holyala at 2011-07-22 10:12:56
这个我有点问题...跑DNA的PAGE电泳要用变性胶么?根据我的经验,双链DNA跑尿素PAGE的时候由于变性导致双链打开,电泳图会非常难看,原本的单一条带会变成非常接近的两个条带。嗯,不过我这种情况是DNA片段较大(> ...

那是因为变性不完全吧 可以先把DNA变性了在跑 就是两条清晰带了
18楼2012-09-24 10:55:50
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一毛钱不包邮

金虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by changes at 2011-07-21 21:44:07
1. “变性”体现在聚丙烯酰胺凝胶中加入尿素(一般跑DNA)或SDS(一般跑蛋白),另外,如果样品也要变性(DNA的loanding buffer也与普通的琼脂糖电泳所用的不同,同理所用Marker也不同;蛋白也要变性)。
2.SRAP一般用变 ...

朋友 你说的那本分子克隆书 是哪个作者出的  写买来看看
19楼2013-05-08 17:28:44
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changes

木虫 (正式写手)

引用回帖:
19楼: Originally posted by 一毛钱不包邮 at 2013-05-08 17:28:44
朋友 你说的那本分子克隆书 是哪个作者出的  写买来看看...

分子克隆实验指南:第三版 (作者:〔美〕J.萨姆布鲁克 等,黄培堂 ) (定价:168.00) (出版社:科学出版社)

第四版的2012年也出来了。可惜太贵买不起,当然目前也用不到。第三版就足矣。
20楼2013-05-09 17:55:30
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