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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?已有1人参与

1  非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?
2  SRAP标记用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,是变性还是非变性?配方是什么?配胶时,过硫酸铵是不是要最后加入?

谢谢(*^__^*) 嘻嘻
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changes

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): 很有经验 2011-07-22 16:55:45
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-22 13:43:13:
多态性。一种观赏花卉50个品种的遗传多样性分析

多态性的话建议使用变性胶检测,使用大板、长板,那样跑出来相当漂亮,也方便统计条带。
另外,材料的亲缘关系最好也明确,对于最终结果的分析有帮助。
15楼2011-07-22 14:49:22
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
墨池(金币+1): 2011-07-21 21:52:46
dhd997(金币+3): good 2011-07-22 08:17:27
西瓜(金币+2, EPI+1): 砖家啊 2011-07-22 12:16:20
1. 变性胶加尿素或者其他变性剂,非变性胶是不加的。一般做RNA分离或回收、蛋白质分子量测定会使用变性PAGE,而DNA跑PAGE通常是采用非变性PAGE,另外回收活性蛋白也有用非变性PAGE的。
2. SRAP(貌似叫什么...相关序列扩增多态性)标记这个应该是非变性PAGE,6%的PAGE胶配方就不用发了吧,google一下一大堆。TEMED和过硫酸铵都是最后加,混匀后再灌胶。
2楼2011-07-21 21:16:21
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-07-21 21:16:21:
1. 变性胶加尿素或者其他变性剂,非变性胶是不加的。一般做RNA分离或回收、蛋白质分子量测定会使用变性PAGE,而DNA跑PAGE通常是采用非变性PAGE,另外回收活性蛋白也有用非变性PAGE的。
2. SRAP(貌似叫什么...相 ...

TEMED和过硫酸铵的先后呢?
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3楼2011-07-21 21:19:38
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todouhy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


墨池(金币+1): 2011-07-21 21:53:09
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-22 12:16:59
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-21 21:19:38:
TEMED和过硫酸铵的先后呢?

最后加APS,也就是过硫酸铵,变性就是用缓冲液中加了SDS
4楼2011-07-21 21:28:48
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