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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?已有1人参与

1  非变性和变性聚丙烯酰胺凝胶的区别?“变性”体现在哪里?
2  SRAP标记用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,是变性还是非变性?配方是什么?配胶时,过硫酸铵是不是要最后加入?

谢谢(*^__^*) 嘻嘻
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阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-07-22 14:22:54:
不知道是哪里的问题啊...如果我理解不对的话,那么冼亮淀粉酶大大说的:“APS和TEMED虽然不好,但也比不上丙烯酰胺有神经毒性,可随皮肤渗入人体,所以我是什么东西都加完之后最后加丙烯酰胺。” 意思难道是所 ...

他是简略回答好不好,就是指母液啦
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
16楼2011-07-22 15:54:39
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holyala

木虫 (著名写手)

砖家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
墨池(金币+1): 2011-07-21 21:52:46
dhd997(金币+3): good 2011-07-22 08:17:27
西瓜(金币+2, EPI+1): 砖家啊 2011-07-22 12:16:20
1. 变性胶加尿素或者其他变性剂,非变性胶是不加的。一般做RNA分离或回收、蛋白质分子量测定会使用变性PAGE,而DNA跑PAGE通常是采用非变性PAGE,另外回收活性蛋白也有用非变性PAGE的。
2. SRAP(貌似叫什么...相关序列扩增多态性)标记这个应该是非变性PAGE,6%的PAGE胶配方就不用发了吧,google一下一大堆。TEMED和过硫酸铵都是最后加,混匀后再灌胶。
2楼2011-07-21 21:16:21
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墨池

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by holyala at 2011-07-21 21:16:21:
1. 变性胶加尿素或者其他变性剂,非变性胶是不加的。一般做RNA分离或回收、蛋白质分子量测定会使用变性PAGE,而DNA跑PAGE通常是采用非变性PAGE,另外回收活性蛋白也有用非变性PAGE的。
2. SRAP(貌似叫什么...相 ...

TEMED和过硫酸铵的先后呢?
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
3楼2011-07-21 21:19:38
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todouhy

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


墨池(金币+1): 2011-07-21 21:53:09
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-22 12:16:59
引用回帖:
Originally posted by 墨池 at 2011-07-21 21:19:38:
TEMED和过硫酸铵的先后呢?

最后加APS,也就是过硫酸铵,变性就是用缓冲液中加了SDS
4楼2011-07-21 21:28:48
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