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yc1crystal

新虫 (初入文坛)

[求助] 求测定谷氨酰胺酶酶活的标准方法,包括分解和转化的酶活,还有些别的困惑,望关注

在看文献时,文献中说谷氨酰胺酶(GA)的一个酶活单位定义为:在30℃下,2.5mM的γ-谷酰基对硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸,100mM咪唑盐酸缓冲液(pH9.0)以及粗酶液中,每分钟生成1μmol对硝基苯胺所需要的酶量。但是文中又分别说明了谷氨酰胺酶的γ-谷酰基转移活力和γ-谷酰基水解活力的测定方法,其中测定水解酶活时用到了对硝基苯胺的那个方法,但是转移酶活的方法根本没有用到γ-谷酰基对硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸。那酶活的单位又怎么定义呢??

  好吧,我承认我笨,还有个问题,就是:在测定酶活时,大多会有一个标准方法,对吧?比如:先准备pH7.0的缓冲液和细胞一起破碎得到上清液即粗酶液,然后用这个粗酶液加入到不同pH的缓冲液中测定不同pH下的酶活,我测出来啦。但是我的反应也要在不同pH值下并且以测定后的酶活为指导把谷氨酰胺酶加入到底物中反应,我不知道这个酶活是要在不同pH下测定的酶活为指导,还是那个标准方法(比如pH9.0)下测出来的为基准。。。
   哎呀呀,我也不知道我说的请不清楚,反正现在这两个主要问题好困扰呀,求高手指点,你的每句话都有可能帮助我呢,多谢大家指教!!

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金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yc1crystal(金币+2, 博学EPI+1): 有关心呀,那我测出酶活之后单位的定义就不一样了,我自己定义?!哈哈 2011-07-16 17:16:39
yc1crystal(金币+2): 有启发,多谢!~! 2011-07-26 09:20:24
但是文中又分别说明了谷氨酰胺酶的γ-谷酰基转移活力和γ-谷酰基水解活力的测定方法,其中测定水解酶活时用到了对硝基苯胺的那个方法,但是转移酶活的方法根本没有用到γ-谷酰基对硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸。那酶活的单位又怎么定义呢??------------------------------这有嘛关系??????
将进酒君莫停
2楼2011-07-16 11:39:03
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