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yc1crystal新虫 (初入文坛)
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[求助]
求测定谷氨酰胺酶酶活的标准方法，包括分解和转化的酶活，还有些别的困惑，望关注
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在看文献时，文献中说谷氨酰胺酶（GA）的一个酶活单位定义为：在30℃下，2.5mM的γ-谷酰基对硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸，100mM咪唑盐酸缓冲液（pH9.0）以及粗酶液中，每分钟生成1μmol对硝基苯胺所需要的酶量。但是文中又分别说明了谷氨酰胺酶的γ-谷酰基转移活力和γ-谷酰基水解活力的测定方法，其中测定水解酶活时用到了对硝基苯胺的那个方法，但是转移酶活的方法根本没有用到γ-谷酰基对硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸。那酶活的单位又怎么定义呢？？ 好吧，我承认我笨，还有个问题，就是：在测定酶活时，大多会有一个标准方法，对吧？比如：先准备pH7.0的缓冲液和细胞一起破碎得到上清液即粗酶液，然后用这个粗酶液加入到不同pH的缓冲液中测定不同pH下的酶活，我测出来啦。但是我的反应也要在不同pH值下并且以测定后的酶活为指导把谷氨酰胺酶加入到底物中反应，我不知道这个酶活是要在不同pH下测定的酶活为指导，还是那个标准方法（比如pH9.0）下测出来的为基准。。。 哎呀呀，我也不知道我说的请不清楚，反正现在这两个主要问题好困扰呀，求高手指点，你的每句话都有可能帮助我呢，多谢大家指教！！   |
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