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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ELISA结果不稳定
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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拉拉_1234

铁虫 (初入文坛)

[求助] ELISA结果不稳定

我用别人已报道的ELISA方法筛出来的阳性血清，然后换个二抗当做新方法的阳性血清来建方法，但是阳性血清的值一直很不稳定，有的时候能达以0.9,但大多数时候只有0.3-0.4之间。
想请教一下这可能是什么原因呀？
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1楼 2011-07-09 11:04:29
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weigb503

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般要注意包被抗原的量，包被时间，封闭液的选择，二抗的浓度，显色时间的控制，做实验的时候记得加入阴性与空白对照，这些都需要你根据你的实验目的去摸索。祝好
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3楼2011-08-03 13:31:49
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

拉拉_1234(金币+1): 谢谢，现在结果稳定了很多，我觉得可能是血清的原因。 2011-08-10 20:28:40
原因有很多种，比如抗原不稳定，封闭时间过长，血清蛋白变性等等。
我现在 也是遇到你这样的问题，原因就有我说的上述几种，还有显色剂配制的不好。最重要的是，ELISA本身就不是很稳定，所以你最好多做下重复实验，这样结果才是最可靠的，实在不行，可惜考虑用其他方法。
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2楼2011-08-01 10:13:04
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