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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC梯度洗脱，总出现很强的一个峰怎么回事？
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC梯度洗脱，总出现很强的一个峰怎么回事？

实验室新买了一台快速色谱，用的是2.1*50的XDB-C18的色谱柱，0.25mL/min的流速，自动进样器进样，乙腈水为流动相，梯度条件是50%B运行4min,线性梯度，10min时乙腈增加到100%，并维持10min,结果不论是运行样品还是只走流动相，还是进甲醇，在大概14min都会出现一个很强的峰，而且基线漂移，同时监测压力可以看到在大约13min到14min之间压力会从大约135bar降到90bar左右，随后采集的信号和压力基本都为直线……请问这到底是怎么回事呢？进样前，色谱柱已经充分平衡好了！很急，谢谢大家的帮助！
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一分耕耘，一分收获。
1楼 2011-07-05 11:54:29
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yukepotato at 2011-07-05 21:21:58:
1、麻烦楼主上下图看看，不知道是怎么个情况。也许是正常的梯度波动，也可能就是出现的问题！
2、应该不会是水方面的原因吧。流动相所用的谁应该都是纯水！

如何贴图啊，不知道……最近两天不能上传附件啊！
水是娃哈哈纯净水，应该没问题吧，而且0.2um滤膜过滤！
100%乙腈冲洗色谱柱50分钟都不见压力和和信号有波动，应该不是柱子污染吧？
难道是像上面的虫友所说的，梯度不合适……超级郁闷啊！
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一分耕耘，一分收获。
15楼2011-07-06 08:33:36
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
急切得到大家的帮助，谢谢！在线等……
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一分耕耘，一分收获。
2楼2011-07-05 11:55:22
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匿名

用户注销 (正式写手)
★
opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-07-05 22:02:17
本帖仅楼主可见
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3楼2011-07-05 12:02:20
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ztagri

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+2): 哇哈哈水回有影响？峰远远大于我的样品峰啊！谢谢 2011-07-05 12:18:13
水，如果是娃哈哈，基本会有峰。仪器不同，峰高不一样，后来买了超纯水基本上基线没出过问题。
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4楼2011-07-05 12:07:49
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