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1949stone荣誉版主 (知名作家)
海纳百川
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[求助]
长片段测序
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长片段测序的方法有哪些好一点（性价比最好的） 可以提供几个公司么？ 片段大概有13000bp左右 没有特殊结构 就是线粒体的一部分 谢谢了 |
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4楼2011-07-04 16:36:08
gwbk
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
1949stone(金币+4): 我想知道长片段测序呢 1万多的片段 2011-07-04 16:43:09
dhd997(金币+3): good 2011-07-04 18:03:02
1949stone(金币+4): 我想知道长片段测序呢 1万多的片段 2011-07-04 16:43:09
dhd997(金币+3): good 2011-07-04 18:03:02
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生工和金斯瑞标称都是用的ABI-PRISM3730，号称国际先进： 我的生工测序说明，序列长度5000bp做定点。 测序结果：与NCBI序列完全相同（定点突变除外）。 测序时，由于荧光染料的干扰，测序结果在引物3'端后面的10至30个，严重时可能达到70个以上碱基不一定能够准确判读，需您根据自己的已知序列信息及测序彩图作出判断。 所用测序仪器为ABI-PRISM3730，测序试剂为BigDyeterminator v3.1。ABI公司对仪器的性能说明为：正常情况下，除了开始约10至30个碱基，在650bp以内可以达到98.5%以上的准确率，但仪器及软件有时也会发生错读或漏读碱基的情况，此时需要您自己判断具体是什么碱基。所以，一般只有进行正反链同时测序，在两个序列完全吻合的情况下，才能确保所得序列100%可靠。单靠一个方向测序得到完全准确的序列是几乎不可能的，这是由仪器本身的性能指标决定的。 正常情况下，一个测序反应可以得到800bp以上，但一般在700bp以后的序列只能作为参考。 也可以考虑华大基因，以前联系过，￥50000测4M的基因组，性价比较高，还附带基因组标注，大片段是他们的强项。 |
2楼2011-07-04 15:56:07
beautybanana
木虫 (著名写手)
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3楼2011-07-04 15:56:39
足下客
木虫 (正式写手)
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5楼2011-07-04 16:55:44
