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chen_hui1984铜虫 (小有名气)
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[求助]
求枯草芽孢杆菌电转感受态制备方法
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| 各位大侠，哪位有枯草芽孢杆菌电转感受态的制备方法，最好附参考文献，小弟不胜感激！ |
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3楼2011-07-03 21:13:34
leimiao_hit
木虫之王 (文学泰斗)
小元
- BioEPI: 1
- 应助: 1336 (讲师)
- 贵宾: 0.707
- 金币: 113729
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- 专业: 蔬菜学与瓜果学
【答案】应助回帖
chen_hui1984(金币+15): 2011-07-04 19:47:40
| 【摘要】：为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进。用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DB1342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5 kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响。结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DB1342的转化率为750 CFU/μgDNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/μg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg DNA。根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内。 |
2楼2011-07-03 20:28:06