24小时热门版块排行榜    

查看: 1149  |  回复: 2

chen_hui1984

铜虫 (小有名气)

[求助] 求枯草芽孢杆菌电转感受态制备方法

各位大侠,哪位有枯草芽孢杆菌电转感受态的制备方法,最好附参考文献,小弟不胜感激!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leimiao_hit

木虫之王 (文学泰斗)

小元

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

chen_hui1984(金币+15): 2011-07-04 19:47:40
【摘要】:为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进。用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DB1342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5 kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响。结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DB1342的转化率为750 CFU/μgDNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/μg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg DNA。根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内。
..........回首向来萧瑟处,归去,也无风雨也无晴...........
2楼2011-07-03 20:28:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkfgwww

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

chen_hui1984(金币+15): 2011-07-04 19:47:46
参考澳大利亚这篇文献吧。
High osmolarity improves the electro-transformation efficiency of the gram-positive bacteria Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis

国内好多实验室能够重复
微生物发酵
3楼2011-07-03 21:13:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 chen_hui1984 的主题更新
信息提示
请填处理意见