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yayadeshen

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于酶基因表达的问题 已有1人参与

我是新手，请教一下。我的实验室将酶基因通过表达载体导入大肠杆菌中表达，用的是融合载体，不切割纯化是不是就没有活性。但是老板说如果纯化的话，该酶就会失活，只要培养基里加底物验证活性就行了。我觉得应该是不对的，想问问大家。PS：我老板是外行，学化学的。
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1楼 2011-06-30 13:09:43
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): good 2011-06-30 18:51:51
看你的融合伴侣具体是什么，还有两者之间的连接肽也非常重要。有些融合伴侣不影响活性的，比如His-tag标签就不影响活性，当然有些融合蛋白只有切割纯化后才有活性。
既然老板这样说了，你就先按照他的意思做下，没有活性就开始做切割纯化。
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2楼2011-06-30 14:02:40
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