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wangdandelia木虫 (正式写手)
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[交流]
两步PCR 已有2人参与
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最近发现两步PCR可以提高引物的特异性，之前用正常的PCR总是会出现非特异性，提高退火温度也不管用，所以，如果在进行PCR扩增时想提高引物特异性的虫友们，不妨试一试两步PCR扩增法（退火和延伸一起进行），但是前提是扩增的片段要短一点，我的目的片段是500bp。 现在把我的扩增程序写下来，仅供参考，希望可以帮助大家： 98℃，2min; 97℃ 15S，69℃ 1min，25个循环； 72℃，10min。 只是我不清楚为什么两步PCR可以提高特异性，如果哪位虫友知道，可以和大家分享一下，谢谢咯~ [ Last edited by wangdandelia on 2011-6-29 at 09:48 ] |
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