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纯渴

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 622.8
散金: 87
红花: 1
帖子: 658
在线: 85.9小时
虫号: 1309081
注册: 2011-05-28
性别: GG
专业: 细胞生长与分裂

[求助] 鼠尾胶原的灭菌

各位虫友，我要做大鼠原代肝的培养，需要用到鼠尾胶原，在配置中把冰醋酸的浓度弄成的0.5%（原本应该是0.1%）不知道有没有影响，还有是冰醋酸没有灭过菌的，整个操作在外面火焰旁操作的，不知道这样的操作会不会染菌
还有就是离心后的胶原到底能不能高压的
有一种想法，把离心后的上清冷冻，在真空干燥成粉末，紫外灭菌——这方法可行不（主要考虑是否会染菌）
最后想问下，大家铺板时胶原的浓度一般多少的（按书上配法原液的浓度是20mg/ml)

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1楼2011-06-28 17:20:06

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xxzcf

铁杆木虫 (小有名气)

BioEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 6802.1
帖子: 83
在线: 37小时
虫号: 648820
注册: 2008-11-07
性别: GG
专业: 生物材料

【答案】应助回帖

纯渴(金币+2): 2011-07-09 09:52:56

引用回帖:

Originally posted by jhu132llh at 2011-07-07 08:23:06:
1.鼠尾胶原提取前得鼠尾要用75的酒精浸泡15-30分钟；
2.0.1%冰醋酸是要提前配置好，过滤除菌的，光在火焰旁操作估计不可靠；3.0.5%估计到不会影响到胶原抽提产量，但是对胶原的使用也许会产生影响，具体的我也 ...

传统上使用0.1-0.5%醋酸，柠檬酸甚至盐酸提取，但是酸性太强，在提取过程中，会造成酸解蛋白质。