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纯渴

金虫 (正式写手)

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[求助] 鼠尾胶原的灭菌

各位虫友，我要做大鼠原代肝的培养，需要用到鼠尾胶原，在配置中把冰醋酸的浓度弄成的0.5%（原本应该是0.1%）不知道有没有影响，还有是冰醋酸没有灭过菌的，整个操作在外面火焰旁操作的，不知道这样的操作会不会染菌
还有就是离心后的胶原到底能不能高压的
有一种想法，把离心后的上清冷冻，在真空干燥成粉末，紫外灭菌——这方法可行不（主要考虑是否会染菌）
最后想问下，大家铺板时胶原的浓度一般多少的（按书上配法原液的浓度是20mg/ml)

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1楼2011-06-28 17:20:06

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xxzcf

铁杆木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

纯渴(金币+3): 2011-07-09 09:52:45

自行提纯，可以讲鼠尾浸泡在灭菌溶液中，甚至70%酒精擦拭。

胶原蛋白加热变性。

可以用Sodium azide，之后透析，不过醋酸也出来了，可以再次添加至0.1%。

紫外灭菌1.仅可以用于表面灭菌，不能深入 2.不能保证100%灭菌，而且很多细菌可以活。 3. 紫外灯的使用寿命在5000小时，经常忘记还要换灯，所以杀菌效果马马虎虎。4.由于穿透力，对于真菌，病毒什么的没什么用。