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slmu3404

金虫 (正式写手)

[求助] 如何根据紫外吸光度确定高效液相吸收波长?

一未知样,要求进行HPLC检测。
首先,我进行了紫外波长扫描,在200处A为0.1为最大,其他波长下A值有0.06、0.03.。。等,还有负值的。
请问,这个可以作为高效液相检测波长的确定吗???如不可以请给予指导。。。
谢谢帮忙!!!
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加油
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专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:21
可不可以对样品进行衍生化,增强紫外吸收呢?
水滴石穿!!
2楼2011-06-27 12:48:31
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zhuiyu_

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:13
先确定一下你的紫外扫描样品浓度是多少。会不会太低。如果浓度比较高还是这样,可以采用别的检测器。比较常用的有蒸发光检测器和示差折光检测器。这两种主要可以检测样品没有紫外吸收的。
3楼2011-06-27 12:54:25
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shelly8059

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 谢谢 2011-06-27 16:14:03
slmu3404(金币+1): 2011-07-01 10:43:14
紫外波长扫描,在200处A为0.1为最大,说明两点,1你的样品没有紫外吸收,可以使用其他检测器代替,如示差折光检测器RID;2你的样品可以使用210nm波长进行分析检测,因为考虑到流动相的截止吸收波长。
海阔凭鱼跃,天高任鸟飞!
4楼2011-06-27 13:29:49
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orange2008

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

slmu3404(金币+1): 2011-06-29 12:45:24
引用回帖:
Originally posted by shelly8059 at 2011-06-27 13:29:49:
紫外波长扫描,在200处A为0.1为最大,说明两点,1你的样品没有紫外吸收,可以使用其他检测器代替,如示差折光检测器RID;2你的样品可以使用210nm波长进行分析检测,因为考虑到流动相的截止吸收波长。

说的相当有道理,还要看下你样品配的浓度,一般是要最大吸收波长处得吸光度在0.3-0.7
5楼2011-06-29 09:52:52
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lordxia

新虫 (初入文坛)

shelly8059 说得很对,很有可能是你的待测物质无紫外吸收,建议增加浓度再看看或换检测器
6楼2011-07-01 17:13:44
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guoanzhong

新虫 (小有名气)

高效液相中的紫外检测器最低检测下限是210nm,到考虑到流动相的紫外吸收相应,一般都会大于210nm的。看来你的样品不适合使用紫外检测器,你可以试试将其连上其他的取代基,比如说连上苯环等有紫外吸收的化合物
每天坚持一点儿!
7楼2011-07-02 11:52:53
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一点相思

银虫 (初入文坛)

在200nm处出现最大值,说明你的样品都测不出峰值啊
8楼2012-05-10 09:39:12
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